马宁虎 肖刚 张媛媛 张林 贺舒阳 戴姗姗 李扬程 郭青玉

激光多普勒血流仪检测年轻上颌切牙牙髓血流的探索

马宁虎 肖刚 张媛媛 张林 贺舒阳 戴姗姗 李扬程 郭青玉

西安交通大学口腔医院儿童口腔科，西安 710004

目的 采用多普勒血流仪检测年轻上颌切牙的牙髓组织血流量（PBF），分析年龄对PBF的影响。方法 采用激光多普勒血流仪检测7～13岁儿童（儿童组）、18～25岁青年人（阳性对照组）的上颌中切牙和侧切牙的PBF，以已行根管治疗的上颌中切牙的PBF为阴性对照组。对各组PBF以及不同性别、牙位间的PBF进行比较，同时分析上颌中切牙与侧切牙PBF间的关系，以及儿童组上颌切牙PBF与年龄间的关系。结果 儿童组中切牙、侧切牙的PBF分别为（11.31±2.21）、（12.18±2.65）PU，阳性对照组中切牙、侧切牙的PBF分别为（8.49±1.88）、（7.52±1.82）PU，阴性对照组中切牙PBF为（2.08±0.73）PU。各组间同名牙及组内中切牙与侧切牙间均存在统计学差异（P＜0.01），而左右侧同名牙之间、不同性别间均无统计学差异（P＞0.05）。中切牙、侧切牙PBF与年龄呈线性负相关关系，Pearson相关系数分别为-0.310和-0.510（P＜0.01）。结论 7～13岁儿童正常上颌切牙PBF值随着年龄的增加而减小。

激光多普勒血流仪； 上颌切牙； 牙髓组织血流量

1986年Gazelius等[1]首次运用激光多普勒血流仪（laser Doppler flowmetry，LDF）测定牙髓组织血流量（pulpal blood flow，PBF），并以此判断牙髓的生活状态。此后逐渐被学者们接受，他们[2-3]认为采用LDF检测方法判断牙髓活力的可靠性明显高于传统的牙髓诊断实验。LDF所测定的血流参数中，血液灌注量使用最广泛，其本质是测量单位体积内的红细胞密度和血细胞平均运动速度的乘积[4]。采用LDF判断牙髓活力客观、无创、有效[5]。研究[6]发现，外伤牙PBF值与其不良预后有明显的相关性，但在临床应用中，许多情况下只能以外伤牙不同时间点的测量结果作比较，缺乏统一而有效的正常参考值范围。 为了揭示不同年龄阶段上颌切牙PBF特征，本研究拟运用LDF测量7～13岁儿童上颌切牙的PBF，分析其特征，并与18～25岁青年人的同名牙PBF进行比较，建立正常参考值范围，为临床工作提供参考。

1 材料和方法

1.1 实验对象的选择与分组

选取2014年9月1日—2015年12月31日期间就诊于西安交通大学口腔医院儿童口腔科的81名患儿为儿童组，其中男45名，女36名；年龄7～13岁，平均年龄（8.99±1.58）岁；测量上颌中切牙和侧切牙各162颗。选取就读于西安交通大学的本科生100名为阳性对照组，其中男女各50名；年龄18～25岁，平均年龄（21.60±2.54）岁；测量上颌中切牙、侧切牙各200颗。另选取上颌中切牙已行根管治疗的患者20名为阴性对照组，其中男性13名，女性7名；测量上颌中切牙20颗。所有受试者待测牙经临床检查确定牙体大小、形态及色泽正常，无牙体硬组织疾病，牙周组织健康。

本研究已通过西安交通大学口腔伦理委员会审批，测量前告知受试者或其监护人本次测量目的、方法及原理，受试者或其监护人均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 设立标准化检测系统 检测系统设立如下。

诊室环境：选择安静、无噪音、室温20～25 ℃的诊室；使用窗帘遮挡自然光线，白炽灯照明。

椅位角度：调整椅位角度使上颌平面与水平面约成45°角。

硅橡胶印模（Heraeus Kulzer公司，德国）的制备：参考相关文献[2,7-8]中隔离周围软组织的方法，制作硅橡胶印模，具体要求如下。1）范围：从右侧上颌尖牙远中至左侧上颌尖牙远中，唇侧全部覆盖牙龈，距前庭沟3～4 mm；腭侧位于尖牙牙尖连线上。2）厚度：印模的整体厚度约为4 mm。3）位置：将牙冠唇面近远中向与切龈向分别3等分，分为9等份，以中间1等份的中央为定位孔，使用低速手机和3号球钻打孔，孔的直径约为2 mm，且方向与牙面相垂直。4）仪器准备：激光多普勒血流仪（Peri Flux System 5010，Perimed公司，瑞典）测量前开机预热30 min，标准校正液校正1次，选择时间常数为0.2 s。5）受试者准备：所有受试者3 h内无剧烈运动，未进食过冷过热饮食，测量前休息10 min，保证情绪稳定后测量。

1.2.2 上颌切牙PBF的测量 在构建的标准化检测系统下分别测量各组待测牙的PBF，测量时间约3 min，在较为平稳的结果中选取10 s的平均值作为检测结果[1]，单位为灌注单位（perfusion unit，PU），收集数据并记录。

1.3 数据处理

利用SPSS 19.0软件对数据进行t检验、相关性分析、线性回归分析，结果以均数±标准差表示，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 2组上颌切牙PBF间的比较

由于儿童组和阳性对照组上颌切牙的PBF左右侧无统计学差异（P＞0.05），故以左右2颗同名牙PBF的平均值作为其PBF值。2组上颌切牙的PBF见表1。统计分析表明，儿童组中切牙、侧切牙的PBF均高于阳性对照组中切牙、侧切牙的PBF（P＜0.01）。阴性对照组中切牙PBF为（2.08±0.73）PU，低于儿童组和阳性对照组中切牙、侧切牙的PBF值（P＜0.01）。

表1 2组的PBFTab 1 PBF of two groups PU

2.2 不同性别及牙位上颌切牙PBF间的比较

对2组不同性别及不同牙位的上颌切牙PBF进行比较，统计分析表明，2组上颌切牙不同性别间PBF的比较均无统计学差异（P＞0.05）；儿童组上颌中切牙的PBF低于侧切牙（P＜0.01），阳性对照组上颌中切牙的PBF高于侧切牙（P＜0.01）。

2.3 2组上颌中切牙与侧切牙PBF间的关系

对儿童组中切牙与侧切牙进行相关性检验，得出Pearson相关系数为0.548（P＜0.01）。以中切牙PBF为因变量、侧切牙PBF为自变量作线性回归分析，得出儿童组线性回归方程为Y（中切牙PBF）=0.46×侧切牙PBF+5.73（P＜0.01）。散点图如图1A所示。

图1 上颌中切牙PBF与侧切牙PBF关系散点图Fig 1 Scatter plot of the relationship of PBF in maxillary central incisor and maxillary lateral incisor

对阳性对照组中切牙与侧切牙PBF进行相关性检验，得出Pearson相关系数为0.562（P＜0.01）。以中切牙PBF为因变量、侧切牙PBF为自变量作线性回归分析，得出阳性对照组线性回归方程为Y（中切牙PBF）=0.61×侧切牙PBF+3.91（P＜0.01）。散点图如图1B所示。

2.4 儿童组上颌切牙PBF与年龄的关系

将儿童组上颌切牙PBF与年龄作相关性分析，得出中切牙、侧切牙PBF与年龄呈线性负相关关系，Pearson相关系数分别为-0.310和-0.510（P＜0.01）。进一步线性回归分析得出，中切牙、侧切牙PBF与年龄的线性回归方程分别为：Y（中切牙PBF）=15.324-0.439×年龄（P＜0.01）（图2A）；Y（侧切牙PBF）=20.087-0.865×年龄（P＜0.01）（图2B）。上颌切牙PBF随着年龄的增加而减小，侧切牙减小的速度大于中切牙。在7～9岁的儿童中，侧切牙的PBF高于中切牙（P＜0.01）；在9～13岁的儿童中，上颌中切牙、侧切牙的PBF无统计学差异（P＞0.05）（表2）。

图2 儿童组上颌切牙PBF与年龄关系的散点图Fig 2 Scatter plot of the relationship between PBF of maxillary incisors and ages of child group

表2 不同年龄段儿童组PBF的比较Tab 2 Comparison of PBF in different age stage of children group

3 讨论

本研究发现，无论是牙根已经发育完成的青年人还是牙根尚处于发育中的儿童，其上颌左右两侧切牙PBF无明显差异，不同性别间同名牙PBF亦无统计学差异。理论上讲，已行根管治疗的牙齿由于没有牙髓血液循环，所测得的PBF应为零或接近零。然而本研究却测得已行根管治疗的上颌中切牙PBF为（2.08±0.73）PU，显著低于健康的上颌切牙PBF，可能原因是受到了周围组织中血管的影响而产生一定的读数。与之前对坏死牙髓血流量的检测结果类似[9]。Roy等[10]发现，受牙龈组织及牙周膜等软组织的影响，已行根管治疗牙齿的PBF与健康牙齿的PBF无明显差异。因此，本研究在实验之初就设立了统一的检测系统，并用不透光的硅橡胶印模覆盖牙齿和牙龈，以减少邻近软组织中血流对牙齿PBF的影响[2,7-8]，同时稳定激光探头，保证重复测量时测量位置不变等。在选取测量位点时，为了既能稍远离牙齿周围的软组织，又能使得测量位点位于髓腔中，故将牙冠唇面均分为九等份，以位于髓室顶稍下方的牙冠唇面中央为测量位点，以期尽可能地排除外界因素的干扰，得到更为真实的数据。选取测量结果时，在所测量3 min的数据中，选取前后均较平稳、无明显波幅的10 s的平均值作为最终的测量结果[1]，以减少测量过程中因受试者的不自主的活动、外界声音以及仪器探头的位移等造成实验误差。

本研究结果显示，青年人上颌中切牙PBF大于侧切牙，可能是因为上颌中切牙的髓腔比侧切牙大，所容纳的牙髓组织较多，所以血管更丰富[11]。本研究结果还表明，青年人上颌中切牙和侧切牙两者呈线性正相关关系。即在同一青年人个体中，上颌侧切牙PBF随着中切牙PBF的升高而升高，反之同理。在临床应用中，可根据该特点结合两者间的线性回归方程推测正常PBF值。与青年人不同，儿童组侧切牙PBF显著高于中切牙。这可能是由于中切牙比侧切牙萌出早，同一患者中切牙牙根的发育相对成熟[12]，侧切牙牙根发育相对滞后，根尖孔开放，因此牙髓血流丰富。本研究中年轻恒牙PBF明显高于发育完成同名牙的PBF，正是因为年轻恒牙髓腔宽大，根尖孔开放，牙髓组织血运丰富之故[13]。

本研究结果表明，7～13岁儿童随着年龄的增加，上颌切牙PBF减小，且上颌侧切牙PBF减小的速度大于中切牙，这可能是因为上颌侧切牙牙体及髓腔均小于中切牙[11]，随着牙根发育，根尖孔不断缩小，牙髓组织迅速减小。同理，儿童组受试者年龄与中切牙、侧切牙PBF呈显著的线性负相关关系，受试者每增长一岁，中切牙、侧切牙PBF分别减少0.439 PU与0.865 PU，这也与牙根发育、根尖孔缩小有关。本研究所纳入的7～13岁儿童包含了上颌年轻恒切牙的诸多阶段，既有牙根发育状态为喇叭口的年轻恒牙，又有牙根发育接近完成的年轻恒牙，具有较好的代表性；但本研究青年组年龄分布相对集中，髓腔体积变化不明显，故未对青年组作年龄与切牙PBF相关性的统计学分析。牙根发育完成后，年龄增长与切牙PBF的变化关系还有待深入研究。

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（本文编辑 李彩）

Study on using laser Doppler flowmetry to determine the pulpal blood flow of immature maxillary incisors

Ma Ninghu,Xiao Gang, Zhang Yuanyuan, Zhang Lin, He Shuyang, Dai Shanshan, Li Yangcheng, Guo Qingyu.
(Dept. of Pediatric Dentistry, Hospital of Stomatology, Xi’an Jiaotong University, Xi’an 710004, China)
Supported by: Shanxi Science and Technology Co-ordination and Innovation Project (2015KTCL09-07). Correspondence:Guo Qingyu, E-mail: guoqinyu@mail.xjtu.edu.cn.

Objective This study aimed to evaluate the influence of age on the pulpal blood flow (PBF) of immature maxillary incisors of maxillary incisors, which was detected by laser Doppler flowmetry (LDF). Methods LDF was used to detect the PBF value of maxillary central and lateral incisors of a child group (aged 7–13 years old) and a positive control group(aged 18–25 years old), as well as the central incisor of a negative control group (the central incisor had undergone endodontic treatment). We then compared the features of PBF in all groups with the influence of gender and position on PBF. The relation of maxillary central incisor and lateral incisor, age, and maxillary incisor were analyzed. Results The PBF value of the negative control group was (2.08±0.73) PU. The PBF values in the positive control group in central and lateral incisors were (8.49±1.88) and (7.52±1.82) PU. In the child group, PBF values in central incisors and lateral incisors were (11.31±2.21) and (12.18±2.65) PU. A significant difference was observed between different groups and between central and lateral incisors (P＜0.01).Meanwhile, no significant difference was found in the PBF values between the right and the left parts in both males and females (P＞0.05). Age had a linearity negative correlation with the PBF value of incisors in the child group. A linear negative correlation existed between the age and PBF of central and lateral incisors (r=-0.310 and r=-0.510, respectively) (P＜0.01). Conclusion PBF value decreased with increased age in children aged 7–13 years old.

laser Doppler flowmetry; maxillary incisors; pulpal blood flow

R 78

A

10.7518/hxkq.2017.05.009

2017-03-15；

2017-07-09

陕西省科技统筹创新工程计划（2015KTCL09-07）

马宁虎，住院医师，硕士，E-mail：maninghu_2008@163.com

郭青玉，主任医师，博士，E-mail：guoqinyu@mail.xjtu.edu.cn