席秀利+黄海波+楼步青+詹若挺+王浩涵

摘要：为提取优化广陈皮基因组DNA，同时利用简单重复序列间扩增（ISSR）分子鉴定技术快速、准确地鉴别茶枝柑及其近缘种。对比4种提取方法后择优提取广陈皮DNA；采用正交优化茶枝柑ISSR-PCR反应体系，筛选100条ISSR通用引物及其退火温度，从而对茶枝柑及近缘种进行遗传多态性分析。结果发现，通过对比cCTAB法提取陈皮组基因DNA产率较试剂盒法提高了10倍，且电泳检测条带清晰明亮，可为后续分子研究提供基础；通过筛选100条ISSR通用引物，最终筛选出10条适合茶枝柑及近缘种的引物，对其进行多态性分析并获得13种植物聚类分析图。因此可知，cCTAB法适合陈皮基因组DNA的提取，并可为其他果皮类植物基因组DNA提取提供参考；ISSR适合茶枝柑及近缘种的遗传多态性分析，可作为其有效分子鉴别手段。

关键词：DNA提取；ISSR；茶枝柑；近缘种；遗传多态性

中图分类号： S666.101文献标志码： A[HK]

文章编号：1002-1302（2017）13-0027-05[HS）][HT9.SS]

收稿日期：2017-01-03

基金项目：国家公益性行业科研专项（编号：201407002）；广东省教育厅高校重点实验室滚动支持项目（编号：2013CXZDA011）。

作者简介：席秀利（1991—），女，湖南衡阳人，硕士，主要从事分子生物学研究。E-mail：840564430@qq.com。

通信作者：黄海波，博士，副教授，主要从事中药品质鉴定与质量评价研究。E-mail：2865055919@qq.com。

[ZK）]

芸香科（Rutacae）柑橘属（Citrus）植物茶枝柑（Citrus reticulata cv. chachiensis）的成熟果皮可入药。茶枝柑的果皮制干即为中药陈皮，陈皮具有理气健脾、燥湿化痰之功效，用于胸脘胀满、食少吐泻、咳嗽痰多等疾病[1]。商业上用于制作中成药、中药饮片、陈皮茶、饮料、添加剂和香料等，具有很高的食用兼药用价值[2]。……