张朝，刘妍如，史鑫波，白宏博，宋忠兴，孙晓春，唐志书

(陕西中医药大学 陕西省中药资源产业化协同创新中心，陕西省中药基础与新药研究重点实验室，陕西 咸阳 712083)

·中药工业·

GC分析不同干燥方法对麝香中麝香酮含量的影响△

张朝，刘妍如*，史鑫波，白宏博，宋忠兴，孙晓春，唐志书*

(陕西中医药大学 陕西省中药资源产业化协同创新中心，陕西省中药基础与新药研究重点实验室，陕西 咸阳 712083)

目的：研究不同干燥方法对麝香中麝香酮含量的影响，为确定麝香较优的干燥方法，提高麝香品质提供实验依据。方法：采用干燥器干燥、减压干燥、40 ℃烘箱干燥对麝香样品进行处理；采用气相色谱法测定麝香酮含量。结果：不同干燥方法处理麝香药材均能达到2015年版《中华人民共和国药典》对麝香酮含量的要求，采用干燥器干燥麝香酮含量最高；减压干燥与烘箱烘干麝香酮含量差别不大，随着时间的增加，麝香酮含量有所降低。结论：不同干燥方法对麝香中麝香酮含量有影响，干燥器干燥为最佳干燥方法。

气相色谱法；干燥方法；麝香；麝香酮

麝香为鹿科动物林麝MoschusberezovskiiFlerov、马麝MoschussifanicusPrzewalski或原麝Moschusmos-chiferusLinnaeus成熟雄体香囊中的干燥分泌物[1]，具有开窍醒神、活血通经、消肿止痛等功效。麝香酮含量是评价麝香质量优劣的指标，也为其主要有效成分，现代研究发现麝香酮有抗痴呆、抗脑缺血、抗炎、抗心肌缺血[2-5]等活性。

中药材种类繁多，性质差异大，含水量、温度等外界因素容易导致药材发生霉变[6]，影响中药材的质量。不同的干燥方式对不同药材的影响各不相同，采用不同干燥方式对中药材干燥药材的性状、含量和临床效果也都产生不同的影响[7-8]，通过比较不同的干燥方式可能找到新的干燥方法，加快干燥速率，节省成本[9]，有效利用和保护中药材资源，充分发挥其疗效，保证临床用药的安全性与有效性。麝香为一种珍贵的药材，其性质特殊，自身有效成分易挥发，新鲜麝香含水量均大于50%[10]，其干燥、储存都存在一定的困难，选择合适的干燥方法，对保护中药材资源有指导意义。目前关于不同干燥方式对麝香中麝香酮含量的影响研究较少，熊卫军等[11]采用不同的方式对麝香进行干燥，仅从干燥后麝香性状和质量变化进行分析，没有对干燥前后麝香酮的含量确切说明；次仁旺姆[12]仅比较干燥失重和未干燥的麝香样品麝香酮含量的变化，方法较为单一，使得结果分析不充分。本实验以3种不同的干燥方法对麝香进行干燥，并采用气相色谱法测定各个干燥时间段的麝香酮的含量，从而考察不同干燥方法对麝香中麝香酮含量的影响，为麝香干燥方式的选择提供一定的借鉴，并对测定麝香酮的不同色谱柱和不同色谱条件进行比较，为麝香酮测定方法的选择提供实验数据。

1 仪器与试剂

1.1 主要仪器

Agilent Technologies 7890B GC System气相色谱仪(美国Agilent 公司)，Chemstation工作站(美国Agilent 公司)，色谱柱：Agilent DB-17(30 m×0.32 mm，0.25 μm，50%苯基-甲基聚硅氧烷，美国Agilent 公司)、Agilent HP-5(30 m×0.32 mm，0.25 μm，5%-苯基-甲基聚硅氧烷，美国Agilent 公司)，Sartorius CPA225D十万分之一电子天平[赛多利斯科学仪器(北京)有限公司]，101型电热鼓风干燥箱(北京科伟永兴仪器有限公司)，VaCo冷冻减压干燥器[嘉盛(香港)科技有限公司]，玻璃干燥器(内径×外径×内高×外高,300 mm×365 mm×235 mm×365 mm)，干燥剂为硅胶。

1.2 药物与试剂

麝香来源于陕西省动物保护协会(批号：20160301、20160302、20160303)，麝香酮对照品(中国食品药品检定研究院，批号：110719-201215)，无水乙醇为色谱级，脱水硅胶。

2 方法与结果

2.1 样品处理

取麝香样品，过1号筛，每个样平均分成3份，分别采用烘箱、真空低温减压和干燥器(脱水硅胶)3种方法干燥，每6 h取样，发现6 h干燥器水分变化差异很小，通过实验，每隔5 d从干燥器取样比较合理，各条件的干燥物理参数见表1。

表1 麝香不同干燥条件参数

2.2 溶液的制备

2.2.1对照品溶液的制备 精密吸取麝香酮对照品制成质量浓度为15.300 mg·mL-1的麝香酮储备液，精密称取麝香酮储备液1 mL加无水乙醇定容于10 mL容量瓶中，制成质量浓度为1.530 mg·mL-1的对照品溶液，备用。

2.2.2供试品溶液的制备 参照《中华人民共和国药典》(2015版)麝香中麝香酮的含量测定的制样方法，精密称取不同干燥方法下所得的麝香样品粉末约0.2 g，精密加无水乙醇2.0 mL，密塞，振摇，放置1 h，0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.3 气相色谱条件

Agilent Technologies 7890B GC System气相色谱仪，色谱柱为Agilent DB-17(30 m×0.32 mm，0.25 μm)，进样口温度：250 ℃，程序升温：初始温度160 ℃，保持2 min，以5 ℃·min-1升至300 ℃，维持10 min；载气：氮气(纯度≥99.999%)，流速：1.0 mL·min-1，进样方式：分流进样(分流比50∶1)，进样量：1.0 μL，检测器：FID检测器，检测器温度：250 ℃。

2.4 线性关系考察

精密吸取2.2.1项下麝香酮储备液0.25、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50 mL，于5 mL容量瓶中，加无水乙醇定容至刻度，配制成质量浓度范围为0.765～7.650 mg·mL-1的系列麝香酮对照品溶液，待用。在上述优化的色谱条件下进行分析，以麝香酮质量浓度为横坐标,峰面积为纵坐标做标准曲线，得到回归方程Y=518.13X-6.472 2；r=0.999 7，表明麝香酮在0.765～7.650 mg·mL-1呈良好的线性关系。

2.5 稳定性试验

取同批供试品溶液，按2.3项色谱条件分别在0、2、4、8、12、24、48 h内测定，麝香酮含量在24 h内的RSD=0.62%，48 h内的RSD=0.61%，表明供试品在24、48 h内稳定。

2.6 重复性试验

取同一供试品溶液，按2.3项色谱条件重复进样6次，RSD=1.24%，表明试验重复性良好。

2.7 精密度试验

取同一对照品溶液，按2.3项色谱条件重复进样6次，RSD=0.82%，表明仪器的精密度良好。

2.8 定量下限与检出下限

取对照品溶液，稀释成系列浓度，按2.3项色谱条件进样，测得定量下限为30.6 μg·mL-1，检出下限为22.8 μg·mL-1。

2.9 加样回收率试验

精密称取已知含量的麝香按2.2.2项制备样品，取2.2.1项下制备的已知量的对照品溶液，样品与对照品总含量的比为0.8∶1、1∶1，1.2∶1，制样，按2.3项色谱条件进样，测定其加样回收率，结果见表2。

表2 麝香中麝香酮加样回收率试验结果(n=9)

2.10 测定结果与结论

通过3种干燥方法对20160301、20160302、20160303 3批麝香样品进行测定，得到各个干燥时段麝香样品中麝香酮含量，见表3。

20160301、20160302、20160303批未干燥前麝香酮含量分别为19.13、21.90、17.69 mg·g-1，含水量分别约为65.3%、62.7%、68.5%，以《中华人民共和国药典》中对麝香含水量小于35%为标准，比较3种干燥方法。40 ℃干燥12 h，平均含水量为13.5%；低温减压干燥6 h，平均含水量为9.3%；干燥器干燥10 d，平均含水量为15.8%，均能达到《中华人民共和国药典》对麝香酮含量和含水量的要求。麝香酮含量的变化趋势都是先增长、后减少，但40 ℃干燥与减压干燥干燥速度快，麝香酮含量变化快、损失较多；干燥器干燥条件温和，能长时间保持稳定，干燥20 d麝香酮含量一直增长，变化趋势越来越小。鉴于麝香为一种贵重动物类药材，相对于其他两种干燥方式，干燥器干燥对其指标性成分的含量影响较小。

表3 不同干燥方法的麝香中麝香酮含量变化

3 讨论

3.1 不同气相条件及不同色谱柱的考察

用GC对吴芬宏[13]测定麝香中麝香酮含量的方法进行优化，分别对检测器、分流比、载气流量等几个因素进行考察，发现麝香酮在检测器250 ℃、分流比50∶1、载气流量为1.0 mL·min-1时有更好的峰形。

对于同一组样品，采用不同的色谱柱和不同的条件进样，得到的峰形如图1所示，得到的色谱峰的各项参数见表4。

注：1.梯度升温DB-17 色谱柱；2.梯度升温HP-5色谱柱； 3.200 ℃恒温DB-17色谱柱；4.200 ℃恒温HP-5色谱柱。图1 麝香酮不同进样条件及色谱柱之间的比较

色谱柱tR对称因子峰高峰面积峰宽塔板数DB⁃17114509331820863000058218321HP⁃5108115427891936490052234887DB⁃175850261834426161201676841HP⁃552815035653238374010314608

由表4可以看出，相同色谱柱在不同的进样条件下保留时间、峰面积、峰宽和塔板数差异都比较大；DB-17色谱柱进样条件不同对对称因子和峰高影响也大；不同的色谱柱对称因子差异较大，200 ℃恒温进样对峰高和理论塔板数影响也较大。由此可见，相对DB-17和HP-5色谱柱，气相条件的改变对麝香酮峰形各参数的影响更大。

3.2 不同干燥方式麝香的性状差异

麝香干燥时，干燥样品的性状也有所差异，各干燥样品外观见图2。40 ℃烘箱中干燥(A)与干燥器中干燥(B)得到的麝香样品均为黑褐色小块状(1～5 mm)，低温减压干燥(C)得到的干燥物呈灰黄色颗粒状(0.5～2 mm)；将3种不同方法干燥的同批样品麝香按2.2.2项方法制备样品，发现低温减压干燥的样品溶液颜色深于其他两种干燥方法，但麝香酮的含量低于其他两种方法，从以上两种现象推测，麝香酮为易挥发性成分，负压条件下麝香酮损失快，低温减压条件下麝香酮的含量相对较低；在无水乙醇中，低温减压干燥的麝香颗粒相对比表面积比其他干燥方式的大，所制备的进样液颜色较其他两种方法深。

注：A.40 ℃烘干干燥；B.干燥器干燥；C.低温减压干燥。图2 麝香不同干燥样品

3.3 几种麝香干燥方法对药材保存的借鉴

温度、比表面积和压力等因素对麝香干燥都会产生影响，干燥后麝香酮的含量会逐渐降低[11]，所以将麝香保存到低温、密封的环境中更有利于药材的长久保存。3种麝香干燥方法中，烘干与低温减压干燥速度快，能很快达到《中华人民共和国药典》中对含水量的要求，干燥条件较为苛刻，麝香酮含量和水分变化快，对于含水量不同的麝香样品，干燥时间难以控制；干燥器干燥时间长，麝香酮和含水量的变化都比较小，是一种相对较优的干燥方式。

对不同的药材，应选择合适的干燥方式。合理的干燥方式应首先从药物的性质方面考虑，有效成分容易损失的药材要考虑干燥方式对药材质量和药效的影响，避免药材的临床应用效果受到影响。

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GCAnalysisofMusconeinMuskbyDifferentDryingMethods

ZHANGZhao，LIUYanru*，SHIXinbo，BAIHongbo，SONGZhongxing，SUNXiaochun，TANGZhishu*

(ShanxiCollaborativeInnovationCenterofChineseMedicinalResourcesIndustrialization，ShanxiprovincekeylaboratoryofnewdrugsandChinesemedicinefoundationresearch，ShaanxiUniversityofChineseMedicine，Xianyang712083，China)

Objective：To study the effect of various drying methods on the content of muscone in Musk and provide the solution to achieve the best condition of drying and enhance the Musk quality.Methods：dryer、freeze vacuum dryingand oven-drying were used to prepare the Musk.The contents of muscone were determined by gas chromatography(GC).Results：The content of muscone could meet the requirement according to Pharmacopoeia of the People′s Republic of China(2015)by above dried methods.Among them the content of muscone in Musk dried by dryer is higher than others.There was slightly difference between freeze vacuum dryingand oven-drying,moreover，the content of musconedecreased with the time prolonged.Conclusion：The impact of various dry methods on the content of muscone is marked and the dryer is the best.

Gas chromatography；drying method；Musk；muscone

国家自然科学基金项目(81501229)；陕西省协同创新计划项目(2015XT-35)；陕西省教育厅专项科研计划项目(320104-203010012)；陕西省科技统筹创新工程计划项目(2011KTCL03-05)

] 唐志书，教授，研究方向：中药制剂制备技术，Tel：(029)38180560，E-mail：tzs6565@163.com；刘妍如，讲师，博士，研究方向：药物分析，Tel：(029)38182207，E-mail：yanzi_2203@aliyun.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.6.022

2016-08-22)

*[