周 巍，李月华，孙 勇，李永波，张 涛，刘 琼，张 岩,*，王丽霞,*

微滴式数字PCR技术定量检测发酵乳中金黄色葡萄球菌

周 巍1，李月华1，孙 勇2，李永波1，张 涛1，刘 琼1，张 岩1,*，王丽霞1,*

（1.河北省食品检验研究院，河北省食品安全重点实验室，河北 石家庄 050071；2.北京食品科学研究院，中国肉类食品综合研究中心，北京 100068）

基于微滴式数字聚合酶链式反应（droplet digital polymerase chain reaction，ddPCR）技术，建立发酵乳中金黄色葡萄球菌定量检测方法。以金黄色葡萄球菌nuc基因为目的片段设计特异性的引物和探针，优化反应体系，通过活菌提取和ddPCR方法对靶标基因的检测特异性和灵敏度进行实验，并对定量结果进行分析。本研究建立了发酵乳中ddPCR技术定量检测金黄色葡萄球菌的方法，检测特异性良好，检测灵敏度为3.3×101CFU/g，定量的偏差率为+10.18%，证明了ddPCR用于绝对定量检测的可行性，为其他食品污染菌和致病菌标准化控制体系提供有益的示范作用。

微滴式数字聚合酶链式反应技术；发酵乳；定量检测；金黄色葡萄球菌

发酵乳中污染菌和致病菌的质量控制需要精准的检测技术体系作为支撑，发酵乳因其营养丰富的特性能够满足污染菌和致病菌的生长需求，单一的对终产品进行检测容易造成原辅料等生产资源的浪费，因而增加了生产成本[1-5]。因此，不同生产环节的污染菌和致病菌数量的精准检测是进行过程质控的关键[6-8]。

由林彩琴等[9]提出的数字聚合酶链式反应（digital polymerase chain reaction，dPCR）作为第3代PCR的技术代表[10]，是把一个样本的反应体系均匀分配……