王娜 邹利 袁江 章红妍 唐莉 王云甫 卢祖能

重症肌无力外周血调节性T细胞线粒体自噬异常的研究

王娜 邹利 袁江 章红妍 唐莉 王云甫 卢祖能

目的 探讨线粒体自噬对重症肌无力(myasthenia Gravis，MG)患者外周血调节性T细胞(CD4+CD25+regulatory T cell，Treg)功能的影响及关系。方法 选择首次确诊、尚未接受治疗的15例MG患者，以15名健康人作为对照，分别采集外周血，以磁珠分选法获得Treg细胞，经流式细胞仪鉴定纯度后，分别通过透射电镜检测Treg细胞线粒体自噬情况、Western Blot法检测微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(microtubule associated protein light chain 3-Ⅱ，LC3-Ⅱ)的表达水平、JC-10荧光探针检测线粒体膜电位(以红色荧光细胞数/绿色荧光细胞数比值表示)变化、羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE，CFSE)检测Treg对正常CD4+T细胞增殖抑制能力(荧光强度越强，增殖抑制能力越强)。结果 与对照组比较， MG组电镜下线粒体自噬明显减少 〔(25.60±7.81)个、(19.20±5.49)个，t=-2.596,P<0.05〕，且变形线粒体较多；MG组LC3-Ⅱ表达明显减少(0.450±0.137、0.334±0.124，t=-2.413,P<0.05)；MG组Treg细胞线粒体膜电位下降 (2.153±0.537，1.726±0.494，t=2.126,P<0.05)；MG组CFSE检测平均荧光强度减弱(34.82±10.64、26.49±5.94，t=2.646,P<0.05)。结论 MG患者有Treg细胞的线粒体自噬功能降低，这可能与其增殖抑制功能降低相关。

重症肌无力；线粒体自噬；Treg细胞

重症肌无力(myasthenia gravis，MG)是主要由乙酰胆碱受体抗体介导、细胞免疫依赖、补体参与、主要累及神经肌肉接头突触后膜乙酰胆碱受体的获得性自身免疫性疾病，常表现为部分或全身骨骼肌的病态疲劳。多项研究证实调节性T细胞(Treg)参与了MG的发病过程。Balandina等[1]的研究中发现虽然MG外周血中CD4+CD25+Treg的数量较健康人没有明显变化，但是其叉状头转录因子3(Foxp3) mRNA的表达及细胞抑制功能是下降的；另有研究表明MG患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T比值下降[2]，CD4+CD25+Foxp3+Treg的数量及Foxp3的蛋白表达也均有下降[3]；Xu等[4]的研究证实MG患者CD4+CD25+Treg的数量下降与功能低下是一致的。由于 CD4+CD25+Treg功能的缺陷，Treg抑制自身反应性T细胞和B细胞活化的功能减弱，结果导致自身反应性T、B细胞的异常激活，从而引发疾病的发生发展。……