超高压提取罗汉果中罗汉果甜苷V的工艺优化
2017-08-24王迪



罗汉果为葫芦科植物罗汉果Siraitia grosvenorii C. Jeffrey ex A. M. Lu et Z. Y. Zhang的干燥果实,性凉、味甘,清热润肺,滑肠通便,用于肺火燥咳,咽痛失音,肠燥便秘。罗汉果苷V作为罗汉果中的主要成分,是评价其质量的指标性成分[2]。本实验以罗汉果甜苷V的提取率为评价依据。
超高压技术应用于中药有效成分提取时,是利用100MPa以上的流体静压力作用于溶剂和中药的混合液,保压一段时间(几分钟)后卸压,然后进行分离纯化。超高压提取是在一个密闭的环境中进行的,没有溶剂的挥发,因此该技术更加符合绿色环保的要求。
本文采用超高压技术,通过单因素实验结合正交试验优化了罗汉果甜苷V的提取工艺,以期为开发罗汉果皂苷类活性成分提供理论依据。
材料与方法
材料与试剂。罗汉果;罗汉果甜苷标准品;甲醇、乙醇(分析纯);乙腈为(色谱纯);水为蒸馏水。
主要仪器与设备。SB25-12D型超声波提取仪;HPP.L3型超高压生物提取设备;岛津高效液相色谱仪LC-15C。
实验方法。
(1)样品的预处理
将罗汉果干燥后粉碎,过40目筛得到样品。
(2)提取罗汉果甜苷V的方法
精确称量用同一批次的样品0.5g,分别按照1:15的料液比加入纯净水,用不同的方法提取罗汉果甜苷。所有实验重复三次,取平均值。提取方法:
①超高压提取(UPE):提取条件的确定见第二部分[4];
②超声提取(UAE):30KHz下,分别提取10min和30min;
③加热回流提取(HRE):100℃下分别水浴提取10min、30min和60min。
(3)色谱条件
提取液用0.45m微滤膜过滤,再用乙醇定容到50ml。检测条件为:Hypersil ODS C18色谱柱(4.0 mm×150 mm, 5m);柱温30℃;检测波长203nm;进样量10μL;流动相A为乙腈,B为水;流速1mL·min-1;梯度洗脱程序为:0-15min,23%乙腈;……
