高 稳 李 剑 倪唤春 谢 坤 罗心平

(复旦大学附属华山医院心内科 上海 200040)

ERK5在急性心肌梗死患者中的磷酸化水平及对体外血小板激活的影响

高 稳 李 剑 倪唤春 谢 坤 罗心平△

(复旦大学附属华山医院心内科 上海 200040)

目的 观察急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血小板中细胞外信号调节激酶5 (extracellular signal-regulated kinase 5,ERK5)的活化水平及其特异性抑制剂XMD8-92对血小板功能的影响,探索ERK5调节血小板活性的分子机制。方法 运用Western bolt法检测AMI患者(n=34)和稳定性心绞痛患者(n=33)血小板ERK5、Akt473及Akt308的磷酸化水平;通过检测体外血小板的聚集,测定不同浓度XMD8-92对胶原(collagen)刺激引起的血小板聚集的影响;利用荧光素酶同期检测XMD8-92对血小板致密颗粒分泌的影响;通过检测血小板在纤维蛋白原上的铺展、在血浆中的收缩,评价血小板整合素ɑIIbβ3的活化水平;运用Western bolt法检测聚集反应中XMD8-92对Akt473、Akt308及PTEN370磷酸化的影响。结果 AMI患者组ERK5及Akt473、Akt308磷酸化水平显著升高(P<0.05);ERK5抑制剂XMD8-92可抑制胶原诱导的血小板聚集、分泌、栓块收缩及在纤维蛋白原上的铺展等活化指标;XMD8-92处理后血小板Akt473、Akt308及PTEN370磷酸化水平减低。结论 ERK5的激活参与了AMI过程中血小板的活化;ERK5可通过调节PTEN的活性,从而调节Akt的磷酸化水平,进而调控血小板的功能。其特异性抑制剂有望成为新的抗栓药物。

ERK5; 血小板; 血栓; 急性心肌梗死

目前,动脉血栓性疾病成为威胁我国人民健康的首位杀手,其死亡率已超过肿瘤。其中冠心病是主要的病种,而冠心病的致死事件多为急性心肌梗死所致。已明确动脉血栓形成的关键步骤为：血管壁受损、动脉粥样硬化斑块破裂暴露血管内皮下基质,血小板立即通过其表面黏附受体 GPIb-IX-V和GPVI 黏附于内皮下胶原(collagen)组织。胶原刺激导致血小板发生一系列信号转导事件,引起血小板产生血栓烷A2以及释放细胞内颗粒内容物(如二磷酸腺苷 ADP等),最终导致血小板整合素 αIIbβ3激活,激活的整合素 αIIbβ3向内传递信号,加强血小板活化、聚集、释放颗粒,启动凝血过程[1]。……