刘宝修 黄建胜 朱乃硕

(复旦大学生命科学学院分子感染与免疫实验室 上海 200438)

AS1411介导STAT3反义寡核苷酸靶向抗肿瘤的作用

刘宝修 黄建胜 朱乃硕△

(复旦大学生命科学学院分子感染与免疫实验室 上海 200438)

目的 研究核仁素核酸适配体(AS1411)介导信号转导与转录激活因子3 (signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)靶向抗肿瘤的作用。方法 以RNA为耦联分子,连接靶向分子AS1411和效应分子ASO。以RNA Structure软件对预合成的不同RNA碱基耦联构建的嵌合体分子二级结构进行预测分析。以琼脂糖凝胶电泳检测嵌合体分子在血清及细胞裂解液中的稳定性。通过流式细胞术和荧光共聚焦实验检测AS1411介导STAT3 ASO进入肿瘤细胞的情况。通过CCK-8试剂盒检测STAT3 ASO对肿瘤细胞生长的抑制情况。通过RT-PCR和Western blot分析ASO对肿瘤生长相关基因表达的影响。结果 AS1411可介导STAT3 ASO高效进入肿瘤细胞,抑制C-myc、CyclinD1、Bcl-xl和PD-L1基因的转录和翻译,并能抑制Du145细胞的生长。结论 AS1411可介导STAT3 ASO靶向进入肿瘤细胞,从而发挥抗肿瘤的作用。

反义寡核苷酸; AS1411; 抗肿瘤; 靶向

肿瘤是威胁公共健康的一类严重的疾病。近年来,我国肿瘤的发病率及死亡率均逐年上升。免疫抗肿瘤疗法是近年来新兴的抗肿瘤治疗手段,主要包括以单克隆抗体介导的单抗药物疗法和嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy,CAR-T)[1-2],此类方法虽有良好的靶向性及较好的疗效,但由于应用范围及作用时效的限制,临床使用也存在一定的局限[3-4]。因此,研发新型低免疫原性小分子靶向药物依然十分必要。

核酸适配体是寡聚体单链DNA或RNA,可高亲和力、高特异性结合目标蛋白受体、多肽、胞内生物大分子[5]。……