舒妮燕 于合国 王玉柱 李卫华 施惠娟 刁 华△

(1复旦大学上海医学院生殖生物学研究室 上海 200032; 2复旦大学生殖与发育研究院,上海市计划生育科学研究所,国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室 上海 200032)

色瑞替尼对精子制动作用和质膜损伤的体外研究

舒妮燕1,2于合国2王玉柱2李卫华2施惠娟2刁 华2△

(1复旦大学上海医学院生殖生物学研究室 上海 200032;2复旦大学生殖与发育研究院,上海市计划生育科学研究所,国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室 上海 200032)

目的 研究前期筛选到的精子功能调节候选化合物色瑞替尼的体外精子制动作用和机制。方法 计算机辅助精液分析(computer assistant sperm analysis,CASA)系统测定色瑞替尼对人和小鼠高活力精子20 s内的制动效果;低渗膨胀(hypo-osmotic swelling,HOS)实验、SYBR-14/PI染色探究精子质膜的完整性;用电镜观察色瑞替尼处理后精子质膜的变化;用色瑞替尼处理VK2/E6E7、End1/E6E7、Ect1/E6E7细胞,CCK-8及荧光染色法检测细胞活性。结果 色瑞替尼对于(5～10)×106/mL人精子的20 s瞬间杀精最小有效浓度(minimal effective concentration,MEC)为(74.87±31.46) μmol/L,而相同条件下测到的杀精药物壬苯醇醚(nonoxynol-9,N-9)的MEC为(219.75±20.89) μmol/L。CASA系统分析表明,色瑞替尼对精子的制动作用有时间-浓度依赖关系。HOS实验及SYBR-14/PI染色法验证色瑞替尼对精子质膜有一定的损伤,并可致精子死亡。电镜显示色瑞替尼处理后的精子质膜破裂,头尾分离较多。色瑞替尼对上皮细胞有一定损伤。结论 色瑞替尼对精子有快速的制动作用,具有潜在的避孕药效。

色瑞替尼; 精子制动; 避孕潜能; 小鼠

精子功能调控已成为不孕不育和安全避孕相关的重要生殖健康课题。……