周晖 ，江楚文，方伟，梁敏文，黄锦维 ，侯铁英

(广东省人民医院广东省医学科学院a.检验科，b.广东省临床检验中心，广州 510080)

·质量管理研究·

ELISA定量检测抗dsDNA抗体试剂盒性能验证方法的探讨

周晖a，江楚文b，方伟a，梁敏文a，黄锦维a，侯铁英a

(广东省人民医院广东省医学科学院a.检验科，b.广东省临床检验中心，广州 510080)

目的 探讨ELISA定量检测抗双链DNA抗体(下简称抗dsDNA抗体)试剂盒的性能验证方法。方法 依据美国临床和实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)批准的EP15-A2文件方法验证精密度。通过检测过往室间质量评价(external quality assessment，EQA)质评物、与比较试剂进行比较、回收试验等3种方法验证准确度。通过检测空白样本验证检测低限(lower limit of detection, LLD)。通过《CNAS-CL39：医学实验室质量和能力认可准则在临床免疫学检验领域的应用说明》、CLSI C28-A3C文件提供的方法验证临界值。通过改良的Doumas法验证线性范围。结果 实测批内、批间变异系数均小于厂家声称的变异系数或按EP15-A2公式计算的验证值。检测EQA质评物阴性符合率为98.4%(63/64)，阳性符合率为100%(20/20)，总符合率为98.8%(83/84)。与比较试剂的阴性符合率为91.2%(52/57)，阳性符合率为87.0%(40/46)，总符合率为89.3%(92/103)，Kappa值为0.783(P=0.062)，两种试剂具有优秀的一致性。平均回收率为99.65%。3种方法验证准确性均通过。实测LLD为0.5 IU/mL，低于厂家声称的1 IU/mL。按CNAS-CL39方法，实测的临界值为18.51 IU/mL，与说明书建议的20 IU/mL接近。按C28-A3C方法，临界值验证也通过。线性回归方程为Y=0.978 8X-3.125 4，r2为0.996 1，截距项-3.125 4与0差异无统计学意义(t=-0.772，P=0.483)。线性范围是1.6～212.5 IU/mL，与厂家声明一致，线性验证通过。结论 候选抗ds-DNA抗体试剂盒的精密度、准确度、LLD、临界值、线性范围与厂家的声明一致，能满足临床诊断与治疗的需要。……