氟苯尼考胶体金免疫层析定量检测方法的建立
2017-08-14韩姣姣胡莉明易扬刘苗夏骏徐国茂
分析化学 2017年8期
韩姣姣+胡莉明+易扬+刘苗+夏骏+徐国茂+罗凯+王琦+赖卫华



摘 要 建立了定量检测氟苯尼考的胶体金免疫层析方法。对胶体金标记抗体时溶液pH和抗体浓度、金标抗体用量、检测线上抗原浓度以及检测时间进行了优化。采用胶体金试纸条读取仪测定试纸条检测线和质控线的信号强度,以标准品的浓度为横坐标,阳性样本和阴性样本的检测线/质控线的信号比值(Bx/B0)为纵坐标建立标准曲线。结果表明,胶体金免疫层析试纸定量检测氟苯尼考的线性范围为0.1~1.5 ng/mL,检出限为0.08 ng/mL,检测时间为15 min。本方法具有简便、快速和可定量等特点,适于大批量样品的现场筛查。
关键词 胶体金; 氟苯尼考; 免疫层析; 定量检测; 试纸条
1 引 言
氟苯尼考(Florfenicol, FF)又称氟甲砜霉素,是美国先灵-葆雅公司于1988年研制成功的一种新型兽医专用氯霉素类广谱抗菌药[1],被广泛用于水产和畜禽养殖中[2]。研究表明,氟苯尼考具有血液系统毒性、胚胎毒性[3]和免疫抑制作用[4,5],动物用药后会出现短暂的厌食、腹泻等不良反应[3]。在养殖过程中,氟苯尼考的过度使用会造成其在动物性食品中产生残留,进而对消费者的身体健康构成潜在威胁[6],并导致耐药菌的产生[7,8]。因此,各国相继规定了氟苯尼考在动物性食品中最高残留限量标准,我国农业部235号公告规定其在猪肉中的最高残留限量为300 μg/kg[9]。
目前,氟苯尼考的检测方法主要有高效液相色谱法[10]、气相色谱法[11,12]、液相色谱-质谱联用法[13,14]、气相色谱-质谱联用法[15]和酶联免疫吸附法[16,17]。……
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