樊 博，齐 盼，张爱莉，赵志红，倪晓辰，刘 彬，马永良，任宗涛

(河北医科大学第四医院泌尿外科，石家庄 050000)



肾细胞癌中DACT2基因启动子区甲基化状态与mRNA表达的研究

樊 博，齐 盼，张爱莉△，赵志红，倪晓辰，刘 彬，马永良，任宗涛

(河北医科大学第四医院泌尿外科，石家庄 050000)

目的 探讨DACT2基因在肾细胞癌(RCC)发生、发展中的作用。方法 收集该院2014年8月至2015年8月59例住院RCC患者肾癌根治术后RCC及相应癌旁组织、正常组织标本，分别应用甲基化特异性PCR(MSP)、实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测其DACT2基因甲基化状态、mRNA表达情况，应用免疫组织化学过氧化酶标记的链霉卵白素(SP)法检测其细胞质内β-catenin蛋白的表达，并分析RCC组织DACT2基因甲基化状态及mRNA表达与临床病理特征的关系，以及DACT2基因甲基化与mRNA及β-catenin表达的关系。结果 RCC组织中DACT2 mRNA相对表达水平(0.427±0.025)明显低于癌旁组织(0.801±0.047)和正常组织(0.872±0.022)，RCC组织中DACT2基因甲基化阳性率(45.76%)明显高于癌旁组织(6.78%)及正常组织(5.08%)，差异均有统计学意义(P<0.05)，而癌旁组织与正常组织比较差异均无统计学意义(P>0.05)。在RCC组织中DACT2基因mRNA相对表达水平及启动子区甲基化发生率与患者的年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、Fuhrman分级等临床资料间均无明显相关性(P>0.05)。甲基化组中DACT2基因的mRNA相对表达水平低于非甲基化组，差异有统计学意义(P<0.05)。RCC组织中β-catenin蛋白在细胞质中的表达率高于癌旁组织和正常组织，差异有统计学意义(P<0.05)，且DACT2基因甲基化与β-catenin蛋白表达呈正相关(r=0.324，P=0.012)。结论 DACT2基因启动子区甲基化及其mRNA相对表达水平降低可能参与RCC的发生，但与RCC的临床进展无关，DACT2基因启动子区发生甲基化可能是引起其mRNA相对表达降低的原因之一，且肾癌组织DACT2基因甲基化的发生可能与β-catenin的高表达有关。

肾肿瘤；DACT2；启动子；甲基化；RNA，信使

表1 RT-PCR及MSP引物序列及反应条件

DACT家族基因是近年来研究较多的一种新的信号通路调控因子，其主要通过对Wnt/β-catenin信号传导通路进行负调控来抑制肿瘤的形成。近年来也有研究表明，由于DACT2基因启动子区发生甲基化导致其表达失活，在肝癌、胃癌、食管癌、乳头状甲状腺癌及结肠癌等恶性肿瘤的发生中起着重要的作用。然……