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氯化钴化学模拟低氧与低氧环境对大鼠肺动脉成纤维细胞的作用比较*

2017-08-12柴晓宇许慧莹刘钟桧刘新民

重庆医学 2017年21期
关键词:实验

柴晓宇,许慧莹,刘钟桧,易 亮,刘新民

(北京大学第一医院老年科,北京 100034)



氯化钴化学模拟低氧与低氧环境对大鼠肺动脉成纤维细胞的作用比较*

柴晓宇,许慧莹,刘钟桧,易 亮,刘新民△

(北京大学第一医院老年科,北京 100034)

目的 比较氯化钴(CoCl2)化学模拟低氧及低氧环境对于原代大鼠肺动脉成纤维细胞(PAFs)增殖、迁移、表型转化的作用。方法 分离培养原代大鼠PAFs,利用CoCl2刺激细胞,或通过低氧细胞培养(1% O2)刺激诱导PAFs,通过CCK-8试验、细胞划痕、细胞迁移、表型转化标志蛋白及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路蛋白表达的实验结果比较CoCl2与低氧环境对于PAFs的作用。结果 与对照组相比,100 μmol/mL CoCl2刺激对PAFs的细胞增殖活力、迁移能力、细胞表型转化能力的作用无明显影响(P>0.05);而1% O2可以明显提高PAFs的细胞增殖活力和迁移活力,并可以使α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达上调(P<0.05)。结论 CoCl2化学模拟低氧与低氧环境对PAFs的促增殖、促迁移、促表型转化作用存在差异。

氯化钴;低氧;肺动脉;成纤维细胞;表型转化

低氧是多种疾病共同的病理生理基础,也是许多科学研究所依赖的实验条件[1-3]。氯化钴(CoCl2)是体外研究中较常使用的化学低氧诱导剂[4],它可以通过增加缺氧诱导因子1α(hypoxia induced factor 1α,HIF-1α)的表达水平而影响下游的低氧反应元件,从而使细胞达到化学低氧的状态[5-7]。肺动脉成纤维细胞(pulmonary arterial fibroblasts,PAFs)在低浓度氧环境中,其增殖活性、运动能力和细胞表型都有显著的改变,而PAFs的这一特性也成为低氧性肺血管重塑的重要病理生理基础[8-9]。α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)是成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的表型蛋白之一,正常PAFs仅少量表达α-SMA蛋白,常作为PAFs细胞表型转化的标志蛋白。本……

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