郭怀斌,刘小帅,张万星,王兰辉,温军业,脱红芳(河北省人民医院,石家庄050051)



缺血后预处理对缺血再灌注大鼠肝内胆管细胞损伤的影响及机制

郭怀斌,刘小帅,张万星,王兰辉,温军业,脱红芳
(河北省人民医院,石家庄050051)

目的 观察缺血后预处理对缺血再灌注大鼠肝内胆管细胞损伤的影响并探讨其机制。方法 取健康雄性SD大鼠24只，随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组，每组8只。假手术组：大鼠麻醉后于上腹部正中取一长3.5 cm纵切口，将腹壁各层依次切开，肝脏显露后进一步游离出肝十二指肠韧带，关腹，无其他干预。缺血再灌注组：在假手术组基础上，游离肝十二指肠韧带，用无损伤动脉夹将肝门区域夹闭，缺血30 min后取下血管夹，使血管开放，对肝脏持续再灌注，最后关腹。缺血后处理组：在缺血再灌注组基础上，血供完全恢复之前再灌注10 s，夹闭10 s，如此反复6个循环(共2 min)后完全恢复血供。比色法测定血清γ-GT、SOD活力，免疫组化法测定胆管组织中Bcl-2和Bax蛋白表达，采用原位缺口末端标记法测算胆管细胞凋亡指数(AI)，HE染色后光镜下观察胆管上皮细胞基本形态学变化。结果 IR组、IPO组、SO组血清γ-GT值分别为(34.64±3.28)、(26.30±3.32)、(17.33±2.08)U/L，三组间两两比较，P均<0.05。SO组、IR组、IPO组大鼠血清SOD活力值分别为(58.26±3.00)、(60.28±3.73)、(61.53±7.99)U/mL，各组间比较，P均>0.05。IR组、IPO组、SO组胆管组织中Bcl-2蛋白阳性表达率分别为(42.67±3.73)%、(77.94±5.25)%、(18.21±4.16)%，三组间两两比较，P均<0.05。IR组、IPO组、SO组胆管组织中Bax蛋白阳性表达率分别为(90.17±2.12)%、(70.10±4.27)%、(30.63±3.00)%，三组间两两比较，P均<0.05。IR组、SO组、IPO组AI分别为79.31±1.12、26.06±2.27、58.90±2.75，三组间两两比较，P均<0.05。IPO组病理改变较IR组明显减轻，肝小叶结构较完整，肝细胞变性程度减轻，汇管区胆管上皮连续完整，炎细胞浸润少。结论 缺血后预处理通过促进肝内胆管组织中Bcl-2蛋白表达、抑制Bax蛋白表达，抑制SD大鼠肝脏缺血再灌注过程中肝内胆管细胞凋亡，从而减轻肝脏缺血再灌注过程中肝内胆管细胞的损伤。

肝内胆管；再灌注损伤；缺血后处理；细胞凋亡；B细胞淋巴瘤/白血病基因-2；B细胞淋巴瘤/白血病基因伴随蛋白x；大鼠

调节B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(Bcl-2)/B细胞淋巴瘤/白血病基因伴随蛋白x(Bax)表达对细胞凋亡有抑制作用[1]，诱导肝脏缺血再灌注(IR)损伤过程中肝细胞凋亡能减轻肝细胞的损伤[2]。……