去卵巢骨质疏松大鼠骨组织肥大细胞增生及其病理学意义
2017-08-07祁珊珊雒志恒冯自立龚帅何佳郝少阳李婉
祁珊珊 雒志恒 冯自立 龚帅 何佳 郝少阳 李婉
陕西理工大学维生素D生理与应用研究所,陕西 汉中 723000
妇女绝经后因卵巢功能下降、雌激素水平骤降,体内骨转换率显著加快,骨吸收的速度超过骨形成的速度,导致骨量丢失、骨密度下降、骨骼脆性增加引起的骨质疏松症称为绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)[1]。组织学和组织化学研究表明破骨细胞活动和骨吸收增加与骨髓肥大细胞增殖有关,研究发现老年性骨质疏松患者骨髓肥大细胞数量明显增加[2-3]。此外,研究发现系统性肥大细胞增生症也会导致骨质疏松[4-6]。然而上述研究仅限于对老年性骨质疏松症患者骨髓肥大细胞的观察,绝经后骨质疏松症是否也伴随骨髓肥大细胞的增生,骨髓肥大细胞增生是否可以成为骨质疏松诊断和治疗的依据?本研究以去卵巢大鼠为绝经后骨质疏松疾病模型,观察和计数肥大细胞在骨质疏松大鼠骨组织中的分布,探讨肥大细胞作为绝经后骨质疏松症诊断和治疗依据的可能性。
1 材料与方法
1.1 实验动物
SPF 级雌性12 w龄未孕SD大鼠20只,体重(245±33)g,由第四军医大学实验动物中心提供[SCXK(军)2012-0007]。所有动物分笼饲养,自由饮水,适应性饲养1 w后进行实验。
1.2 试剂与仪器
大鼠雌二醇(estradiol,E2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand ,RANKL)测定试剂盒均购自上海酶联生物科技有限公司。仪器主要有酶标仪(Biotek)、石蜡组织切片机(Leica RM2235)、倒置荧光显微镜(Nikon)、计算机图像分析系统(Image pro plus 6.0)。
1.3 卵巢去除手术
将20只SD大鼠分为假手术组(Sham组)和去卵巢组(OVX组),其中Sham组10只,OVX组10只。……
