姜宏佺 丰宏林 孙晓嘉



·论 著·

胍那苄对运动神经元的内质网应激细胞模型具有保护作用

姜宏佺 丰宏林 孙晓嘉

目的 探讨P-eIF2α去磷酸化抑制剂胍那苄(guanabenz，GA)对胚胎小鼠运动神经元样杂交细胞系(mouse motor neuron-like hybrid cell line,NSC34)的内质网应激模型是否具有保护作用及是否能够减少外源性SOD1 G93A蛋白的合成。方法 (1)应用依霉素(Tunicamycin，TM)作用到鼠运动神经元样杂交细胞系(mouse motor neuron-like hybrid cell line,NSC34)，获得运动神经元ERS模型；再给予不同浓度的GA通过显微镜及MTT方法观察GA对运动神经元ERS模型细胞数量及细胞活力的影响；用Western Blot方法检测TM、GA对NSC34细胞系ERS蛋白eIF2α和P-eIF2α的影响；(2)应用慢病毒转染的方法制作SOD1 G93A NSC34稳定转染细胞系，通过Western blot方法检测GA对外源性SOD1 G93A蛋白以及内源性mouse SOD1蛋白表达量的影响。结果 (1)在NSC34的ERS模型中多个浓度的GA与对照组比较可以显著增加细胞数量，提高细胞活力(P<0.05)；GA可以增加ERS相关蛋白P-eIF2α的表达量；(2)GA在SOD1 G93A NSC34细胞系中能够减少外源性hSOD1蛋白的表达量，而对内源性的mouse SOD1蛋白表达量没有明显影响。结论 (1)GA可能通过增加P-eIF2α的表达量而对NSC34细胞系的ERS模型具有保护作用；(2)GA在SOD1 G93A NSC34细胞系中可以减少外源性hSOD1蛋白的表达量。

神经系统变性病 肌萎缩侧索硬化 胍那苄 内质网应激 SOD1

肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)又称Charcot病或Lou Gehrig病，是一种致死性神经系统变性病，以脊髓前角细胞、脑干运动神经核和锥体束同时受累，以上、下运动神经元损害并存为特征，致使随意运动逐渐丧失、呼吸肌麻痹或合并呼吸道感染而最终死亡，平均病程3～5年[1]。ALS是一个多因素作用的疾病，它的确切发病机制尚不清楚，可能与SOD1基因突变、线粒体功能障碍、氧化应激、兴奋性氨基酸毒性、内质网应激、胶质细胞病变、自噬、免疫炎症等机制有关[2-3]。近年来内质网应激(endoplasmic reticulum stress，ERS)逐渐成为ALS研究领域的热点[4-6]。我们的前期研究发现胍那苄(guanabenz，GA)作为P-eIF2α去磷酸化抑制剂，可以延长ALS转基因小鼠的生存期，延缓发病时间及运动功能减退[7]。……