张凤兰，杨璐军，朱红梅，张南炀，沙学芳，朱柯颖，肖志成,5*

(1.昆明医科大学分子临床医学研究院,云南省干细胞和再生医学重点实验室，昆明 650500； 2.深圳市宝安区人民医院，深圳 518101； 3.南方医科大学珠江医院神经外科,广东神经外科研究所,广东省脑功能修复与再生重点实验室，广州 510282；4.昆明医科大学基础医学院，昆明 650500； 5.澳大利亚莫纳什大学免疫与干细胞研究中心，墨尔本VIC3010)

不同胎龄小鼠脑组织中神经干细胞所占比例的研究

张凤兰1，杨璐军2,3，朱红梅1，张南炀1，沙学芳4，朱柯颖4，肖志成1,5*

(1.昆明医科大学分子临床医学研究院,云南省干细胞和再生医学重点实验室，昆明 650500； 2.深圳市宝安区人民医院，深圳 518101； 3.南方医科大学珠江医院神经外科,广东神经外科研究所,广东省脑功能修复与再生重点实验室，广州 510282；4.昆明医科大学基础医学院，昆明 650500； 5.澳大利亚莫纳什大学免疫与干细胞研究中心，墨尔本VIC3010)

目的 详细了解并比较不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中神经干细胞(neural stem cells，NSCs)所占比例，为后期优化分离培养NSCs提供直接量化数据。方法 分离不同胎龄小鼠全脑(胎龄12.5、14、16和18 d)和大脑皮层(胎龄14、16 和18 d)组织，消化成单细胞悬液，贴壁培养3 ～ 4 h，细胞免疫荧光标记NSCs特异性标记物Nestin，统计分析各组中NSCs所占比例。另外，通过实时荧光定量PCR技术检测Nestin mRNA在不同胎龄(12.5、14、16和18 d)小鼠大脑皮层中的表达水平。结果 细胞免疫荧光结果显示，分离培养的不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中均有Nestin阳性细胞。在分离培养的小鼠全脑组织中胎龄12.5 d组NSCs所占比例最高，为53.42% ± 1.57%；……