余 强，刘月环，王志远，吴旧生

(1.浙江大学动物科学学院，杭州 310058； 2.浙江省医学科学院，杭州 310013)

高通量测序法研究不同pH的饮用水对SPF小鼠肠道微生物的影响

余 强1,2#，刘月环2#，王志远2，吴旧生1*

(1.浙江大学动物科学学院，杭州 310058； 2.浙江省医学科学院，杭州 310013)

目的 研究不同pH饮用水对SPF小鼠肠道微生物多样性的影响。方法 21日龄SPF小鼠90只随机分成3组，每组30只，分别给予三类水，即酸化水(pH 3.0)，中性水(pH 7.0)和碱性水(pH 9.0)，并进行为期三个月的饲养。每组分别在饲养4周、8周、12周末各处死10只动物，取血清按SPF国标项目检测了细菌、病毒、寄生虫，取回盲部内容物，根据细菌16S rRNA的保守性设计引物，构建文库，进行高通量(Illumina)测序，获得10 G的数据，并对数据进行统计，聚类分析。结果 以pH 3.0处理的小鼠肠道微生物丰富度适中，稳定性高。结论 在规模化饲养条件下，选取pH 3.0饮用水小鼠能较长时间维持肠道微生物多样性，稳定性达到一个平台。本研究为长期稳定维持动物质量的生产实践提供了理论与技术支持，也是胃肠道宏基因组学技术在动物质量控制领域的一个具体应用。

肠道微生物；16S rRNA；高通量测序；饮用水；小鼠

目前，大多数实验动物中心都采用动物饮用水作酸化处理的办法来解决清洁级以上实验动物的饮水问题[1]。有些单位将饮用水高压灭菌(121℃，25 ～ 30 min)后酸化至pH 2.5左右(pH 2.5 ～ 3.0)效果比较理想，也有一些单位使用碱化水(pH 9.0)长期饲养动物，效果也相对理想。最近有报道表明，动物肠道微生物对其实验结果有相对大的影响，许多科研结果不能重复也归咎于肠菌的影响[2]。……