VEG株弓形虫卵囊对昆明小鼠的毒力研究
2017-08-01陆瑶瑶冯永杰杨玉荣
陆瑶瑶,冯永杰,董 辉,杨玉荣
VEG株弓形虫卵囊对昆明小鼠的毒力研究
陆瑶瑶,冯永杰,董 辉,杨玉荣
目的 探究VEG株弓形虫卵囊对中国昆明小鼠的致病性。方法 分别选择<1个,100个~108个的VEG株弓形虫卵囊灌胃昆明小鼠,采用MAT、H&E和IHC方法研究小鼠对弓形虫的感染情况,并分析小鼠感染率,生存率及其大脑内的弓形虫包囊数量。结果 ≥102个VEG株弓形虫卵囊可引起小鼠100%感染,最低致死剂量为102个卵囊,100%致死剂量为108个卵囊,急性期死亡时间为7 DPI~14 DPI,弓形虫的成囊率是32.14%(9/28),包囊数量为9~857个/只小鼠大脑,感染小鼠生存率为67.44%(29/43),最长存活时间≥390 DPI。结论 VEG株弓形虫卵囊对昆明小鼠的毒力中等,包囊形成率较高。
VEG虫株;弓形虫卵囊;昆明小鼠;包囊;致病性
刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)是一种胞内寄生虫,分布广泛,它可以感染所有有核细胞的恒温动物,包括人类、家禽、家畜等,从而引起弓形虫病[1]。猫科动物是弓形虫的终末宿主,弓形虫可以在其体内进行无性生殖和有性生殖。几乎所有恒温动物都是弓形虫的中间宿主,吞食或饮用了被弓形虫卵囊污染的食物或水源,或者食用了未煮熟的含有弓形虫包囊的肉品[2],弓形虫可侵入肠壁经血液或淋巴液扩散至全身各组织,若宿主免疫力正常,则虫体繁殖受阻,形成包囊;若宿主免疫力低下,或弓形虫毒力较强,数量较多,可以引起弓形虫急性感染而死亡。VEG株弓形虫是Ⅲ 型弓形虫的代表虫株,关于其对我国昆明小鼠的致病力研究,还未见报道。本试验采用改良凝集试验(Modified Agglutination Test,MAT),常规病理学方法,苏木素与伊红对比染色法(Hematoxylin-Eosin staining,H&E)和免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)染色技术,研究VEG株弓形虫对昆明小鼠的毒力,为弓形虫卵囊入侵机制及防治提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 弓形虫卵囊及主要试剂 VEG株弓形虫卵囊、兔抗弓形虫多克隆抗体、弓形虫抗原受赠于美国农业部Dubey实验室,小鼠Specific HRP/DAB(ABC)Detection IHC kit 购自abcam公司(货号:ab64264)。
1.2 试验动物及处理 6~8周龄健康昆明小鼠55只,购于郑州大学实验动物中心(实验动物处理遵守动物伦理与福利相关规定)。……
