刘宝山，赵芝娜，赵雨杰，王桂珍



肺炎支原体CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的表达及鉴定

刘宝山1，赵芝娜2，赵雨杰3，王桂珍3

目的 探讨肺炎支原体CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的免疫反应活性。方法 对CARDS毒素蛋白的抗原表位进行分析，选取10个重要的表位进行拼接，反向翻译后合成并克隆，插入pET28a表达载体构建pET-CARDS表达质粒并转入受体菌。经IPTG诱导表达的多表位拼接CARDS蛋白使用6×His单克隆抗体和人阳性血清进行了免疫印迹的检测。结果 CARDS毒素蛋白的多表位拼接抗原表达载体构建成功，诱导后表达大小为30KDa的重组蛋白，Western blot测定其能与6×His单克隆抗体和人阳性血清发生反应。结论 本研究选取的CARDS毒素蛋白抗原表位具有较强的免疫活性，可为Mp感染的诊断提供新的候选抗原。

肺炎支原体；CARDS毒素蛋白；多表位拼接抗原；表达；鉴定

肺炎支原体(Mycoplasmapneumonia，Mp)是社区获得性呼吸道感染的重要病原体，约占社区获得性肺炎的10%～40%，并呈增加趋势[1]。其不但引起呼吸系统炎症，而且与哮喘的发病密切相关，并可引起广泛多系统肺外并发症[2-3]。

近年来，一种被称为社区获得性呼吸窘迫综合征(community acquired respiratory distress syndrome，CARDS)毒素的抗原在Mp感染中的作用引起人们的关注。最新研究发现肺炎支原体毒力因子社区获得性呼吸窘迫综合征毒素(community acquired respiratory distress syndrome toxin，CARDS TX)是由MPN372基因编码的591个氨基酸的蛋白质，主要分布于胞膜和胞质，具有二核酸腺苷核糖转移酶活性[4]，依靠膜联蛋白A2结合真核细胞[5]，参与侵犯呼吸道等病理生理过程[6-7]，因而被认为是Mp的一个重要毒力因子。……