朱荟云，吴 芳，吴江东，张 杰，董江涛，章 乐，张 帅，张大龙，武青青，张万江



类泛素-蛋白酶体系统和药物外排泵抑制剂对结核分枝杆菌单纯利福平耐药性影响的研究

朱荟云1，吴 芳1，吴江东1，张 杰2，董江涛3，章 乐1，张 帅1，张大龙4，武青青4，张万江1

目的 探讨类泛素-蛋白酶体系统对结核分枝杆菌单纯利福平耐药性的影响。方法 采用刃天青显色法检测利福平对结核分枝杆菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration，MIC)，比较分析结核分枝杆菌Pup、Dop、PafA、Mpa基因的过表达或缺失突变对结核分枝杆菌利福平MIC的差异；检测分别加入羰基氰氯苯腙、利血平、维拉帕米和氯丙嗪4种外排泵抑制剂前后各菌株对利福平MIC的影响。结果 结核分枝杆菌Pup、Dop、PafA和Mpa基因的过表达均能增强单纯耐利福平结核分枝杆菌对利福平的耐药性，而Pup、Mpa、Dop和PafA基因的缺失均能显著降低单纯耐利福平结核分枝杆菌对利福平的耐药性，P值均<0.05。4种药物外排泵抑制剂能不同程度的降低各过表达菌株对利福平的MIC，P值均<0.05，并且，类泛素-蛋白酶体系统与外排泵抑制剂之间存在一定交互作用。结论 类泛素-蛋白酶体系统对结核分枝杆菌单纯利福平耐药性的产生有影响；类泛素-蛋白酶体系统可能通过调控外排相关通路蛋白来影响结核分枝杆菌单纯利福平耐药性的产生。

结核分枝杆菌；类泛素-蛋白酶体系统；利福平；最小抑菌浓度；药物外排泵；耐药性

结核病(Tuberculosis，TB)是一种由结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis，MTB)引起的一种感染性疾病，也是一种人兽共患病。半个世纪前由于使用了抗结核药物,结核病疫情得到一定的控制[1]。然而，由于耐药结核病，特别是耐多药(multi-drug resistant，MDR)结核病的出现，影响了结核病的有效治疗和控制[2]。我国结核病利福平(rifampin ，RFP)耐药率为9.63%，高于全球平均水平[3]。因此，本文将探讨研究耐利福平结核杆菌耐药机制。

2008 年，Pearce等人[4]在结核杆菌中发现了分枝杆菌蛋白酶体降解信号原核类泛素蛋白(Prokaryotic ubiquitin-like，Pup) ，结核杆菌的Pup与结核杆菌蛋白酶体组成了结核杆菌Pup-蛋白酶体系统 (Pup-poroteasome system，PPS) 。……