补肾活血方对AGEs条件下体外纯化培养大鼠视网膜Müller细胞HIF-1α介导缺氧信号通路的影响
2017-08-01秦伟谢学军李志英宋明霞曹新伟马殿伟荣素然陈一兵王雪菁
秦伟,谢学军,李志英,宋明霞,曹新伟,马殿伟,荣素然,陈一兵,王雪菁
·论著:实验研究·
补肾活血方对AGEs条件下体外纯化培养大鼠视网膜Müller细胞HIF-1α介导缺氧信号通路的影响
秦伟1,谢学军2,李志英3,宋明霞2,曹新伟2,马殿伟2,荣素然2,陈一兵1,王雪菁1
目的观察在晚期糖基化终末产物(AGEs)条件下,补肾活血方含药血清对大鼠视网膜Müller细胞的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)缺氧信号通路的影响。方法采用SD大鼠制备补肾活血中药含药血清和空白血清,以终浓度50mg/L的AGEs作为低AGEs条件,终浓度100mg/L的AGEs作为高AGEs条件,将体外纯化培养的P2代视网膜Müller细胞分为6组,分别置于加入空白血清、中药含药血清、空白血清+低AGEs、空白血清+高AGEs、中药含药血清+低AGEs、中药含药血清+高AGEs的DMEM培养基中,培养48 h后酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞外液中HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)含量,逆转录-聚合酶链法(RT-PCR)测定各组Müller细胞HIF-1αmRNA、VEGFmRNA表达量,比较差异。结果1.低AGEs组较正常对照组HIF-1α值有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),HIF-1αmRNA值明显升高,其差异有统计学意义(P<0.05),高AGEs组较正常对照组HIF-1α、HIF-1αmRNA值明显升高,其差异有统计学意义(P<0.05);低、高AGEs组较正常对照组VEGF、VEGFmRNA值明显升高,其差异有统计学意义(P<0.05)。2.正常中药干预组HIF-1α、VEGF、HIF-1αmRNA、VEGFmRNA值接近正常对照组,差异无统计学意义(P>0.05)。3.低、高AGEs中药干预组HIF-1α、VEGF、HIF-1αmRNA、VEGFmRNA值均较对应的低、高AGEs组明显降低,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论补肾活血方含药血清可抑制视网膜Müller细胞在AGEs条件下HIF-1α介导缺氧信号通路的高表达,这可能是补肾活血方防治DR的机制之一。
补肾活血;Müller细胞;低氧诱导因子;晚期糖基化终末产物;……
