李琳琳 严林 金生英 谢久祥 温小成

摘要：为探讨适合枸杞棉蚜基因组DNA提取的方法，采用9种方法提取枸杞棉蚜基因组DNA，并对每种方法提取的DNA样本质量进行综合比较分析。结果表明，改进十二烷基硫酸钠（SDS）法、优化KAc法、STE精提法、Chelex粗提法、十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）法、盐析法均可从枸杞棉蚜中提取总DNA，浓度高且所制备出的DNA均可成功应用于mtDNA CO[QX（Y15]Ⅰ[QX）]基因扩增。STE粗提法、Chelex精提法、饱和NaCl法Ⅱ提取的枸杞棉蚜基因组DNA质量低，不能满足分析要求。改进SDS法及STE精提法所制备的DNA质量较佳、产量较高、实用性强，是值得推广应用的枸杞棉蚜基因组DNA提取方法。盐析法提取DNA，试剂成本低、毒性小，是一种安全有效的枸杞棉蚜基因组DNA提取方法。Chelex粗提法是一种快速的枸杞棉蚜基因组DNA提取方法。

关键词：枸杞；棉蚜；基因组DNA；提取方法

中图分类号： S435.671文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2017）10-0030-04

枸杞棉蚜（Aphis gossypii Glover）属同翅目（Hompotera）蚜科（Aphididae）蚜属（Aphis），是我国西北地区栽培枸杞（Licium barbarum L.）分布地的主要害虫，短期内可暴发成灾，引起枸杞果产量和品质严重下降[1]。棉蚜具有明显的生物型[2-3]，如棉花型和黄瓜型[4-5]，而枸杞棉蚜属于何种生物型亟待验证。确定昆虫的生物型，不仅需要采用传统的生物学特征和生态学参数比较[4，6-7]，而且需要分子遗传学数据佐证[2，7-8]。

单头枸杞棉蚜基因组DNA提取是开展枸杞棉蚜分子遗传学研究的前提与基础[9]。由于枸杞棉蚜体型微小，体表有外骨骼，其DNA提取有一定难度。Black等通过十二烷基硫酸钠（SDS）方法提取蚜虫基因组DNA，并通过随机扩增多态性DNA-PCR（RAPD-PCR）检测蚜虫多态性[10]；……