李文见 丁凯利 王喆 彭盼盼

（商丘市中心医院肿瘤内科，河南商丘476000）

Skp2蛋白在肺癌癌组织中表达及与临床病理特征的关系

李文见 丁凯利 王喆 彭盼盼

（商丘市中心医院肿瘤内科，河南商丘476000）

目的研究Skp2蛋白在肺癌癌组织中表达及与临床病理特征的关系。方法选取2012年3月至2016年3月在我院就诊经病理检查确诊为肺癌患者的存档蜡块标本78例。选取同期在我院进行检查的30例健康患者的正常肺组织进行对照研究，进行免疫组化法检测，比较Skp2蛋白在正常肺组织与肺癌组织之间的表达以及Skp2蛋白表达与临床病理特征间的关系。结果肺癌组织中的Skp2蛋白阳性率为44.9%显著高于正常肺组织的6.7%（P＜0.05）。Skp2的阳性表达与肺癌组分化程度、TNMT分期、淋巴结转移相关（P＜0.05）。结论Skp2蛋白与肺癌的发生与发展存在密切联系，参与肺癌组织的侵袭与转移，对判断肺癌患者预后具有重要意义。

肺癌；Skp2；免疫组化

肺癌是临床最常见的恶性肿瘤之一，在生活方式改变、大气环境污染等因素影响下，肺癌发病率呈逐年上升趋势，对人类健康造成极大威胁[1]。肺癌的病因与具体发病机制目前尚未完全明确，随着分子生物学进展，越来越多的研究表明肺癌与细胞周期蛋白存在密切联系[2]。S期蛋白激酶相关蛋白2（S-phase kinase associated protein 2，Skp2）可能参与肺癌的发生与发展。目前针对Skp2蛋白在肺癌癌组织中表达及与临床病理特征的关系研究较少，因此本研究通过免疫组织化学方法检测正常肺部组织与肺癌组织中Skp2蛋白表达，分析Skp2蛋白表达与肺癌临床病理特征之间的关系，以期为临床诊断提供科学依据。

1 资料与方法

1.1 标本来源：选取2012年3月至2016年3月在我院就诊经病理检查确诊为肺癌患者的存档蜡块标本78例。其中男55例，女23例，年龄39～66岁，平均（42.56±13.38）岁；组织学分类：腺癌49例，鳞癌29例；分化程度：高分化26例，中分化32例，低分化20例；肺癌TNM分期：Ⅰ期19例，Ⅱ期36例，Ⅲ期23例。所有患者术前均为接受放化疗、免疫治疗等，临床病理资料完整。选取同期在我院进行检查的30例健康患者的正常肺组织进行对照研究。

1.2 免疫组织化学染色：采用切片机行4 μm石蜡连续切片，切片常规脱蜡、水化。分别进行免疫组化染色，具体操作过程参照S-P试剂盒说明书进行。抗原修复后滴加一抗，置入冰箱过夜后次日取出，滴加二抗，恒温箱孵育30 min，滴加酶作用底物DBA溶液观察显色情况，冲洗后复染、脱水、封片。以PBS代替一抗做阴性对照，以已知的Skp2蛋白阳性标本为阳性对照。

1.3 结果判定标准：Skp2蛋白表达以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性。参考Gstaiger等[3]的方法，随机选取5个高倍视野计数，≥500个细胞，取平均值为细胞阳性率，细胞阳性率＞20%为阳性，细胞阳性率≤20%为阴性。

1.4 统计学处理：采用SPSS19.0统计学软件对数据进行分析和处理，计数资料采取率（%）表示，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Skp2蛋白在肺癌组织与正常肺组织中的表达：Skp2在肺癌组织中的表达显著高于正常肺组织（χ2=14.042，P＜0.05），提示Skp2高表达可能与肺癌发生发展相关，详见表1。

表1 Skp2蛋白在肺癌组织与正常肺组织中的表达

2.2 Skp2蛋白表达与肺癌临床病理特征的关系：Skp2的阳性表达与年龄、性别、组织学类型无相关性（P＞0.05）。Skp2的阳性表达与肺癌组分化程度、TNMT分期、淋巴结转移相关（P＜0.05），详见表2。

3 讨论

在全球范围内，肺癌发病率与死亡率呈逐年上升趋势，对人类健康造成极大威胁[4]。周期蛋白表达紊乱导致肿瘤细胞异常增生，是肺癌发生与发展的关键[5]。Skp2属于F-box蛋白家族成员，可能与肿瘤的发生与发展存在紧密联系。本研究显示，Skp2高表达可能与肺癌发生发展相关，Skp2的阳性表达与肺癌分化程度、TNMT分期、淋巴结转移相关。

Skp2蛋白是新近发现的一种癌基因，可以通过降解细胞周期蛋白与细胞周期蛋白依赖性激酶复合体，参与细胞周期调控，引起细胞增殖。Skp2蛋白对肺癌患者的早期诊断与预后具有重要作用。TNM分期是目前国际上常用的肿瘤分期系统，分期越高表明肿瘤进展程度越高，在本研究中，Skp2蛋白阳性表达随TNM分期提高而升高，Skp2蛋白参与肺癌的发生与发展。淋巴结转移是肿瘤最常见的转移方式，表明肿瘤细胞有病灶开始向周围组织及器官扩散转移，在淋巴结转移的肺癌组织中Skp2蛋白阳性表达显著高于无淋巴结转移的肺癌组织，Skp2蛋白高表达参与肺癌组织的侵袭与转移。肺癌分化程度常用来判断肿瘤的程度，分化程度越低，癌细胞形态结构与正常细胞结构差异越大，本研究中低分化肺癌组织中Skp2蛋白阳性率显著上升，Skp2蛋白表达与肺癌的预后存在密切联系。

表2 Skp2蛋白表达与肺癌各项临场病理特征的关系

综上所述，Skp2蛋白的高表达在肺癌的发生与发展中具有重要作用，可以作为判断肺癌患者预后的重要指标。

［1］韩仁强，郑荣寿，张思维，等.1989年-2008年中国肺癌发病性别、城乡差异及平均年龄趋势分析［J］.中国肺癌杂志，2013，16（9）：445-451.

［2］胡素贤，孔祥余，原阳阳，等.肺癌组织中AKAP95与细胞周期蛋白D1和E1及临床病理学指标的关系［J］.中华劳动卫生职业病杂志，2013，31（12）：890-894.

［3］Gstaiger M，Jordan R，Lim M，et al.SKP2 is oncogenic and over-expressed in human cancers［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2001，98（9）：5043-5048.

［4］姚晓军，刘伦旭.肺癌的流行病学及治疗现状［J］.现代肿瘤医学，2014，22（8）：1982-1986.

［5］王萍，宋玉仙，窦静杰，等.新化合物D261抑制非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖及其作用机制［J］.中国药理学通报，2013，29（3）：442-443.

Research on Relationship between Skp2 Protein Expression and Its Clinical Pathological Features in Lung Cancer Tissue

Li WenjianDing KailiWang ZhePeng Panpan
（Department of Medical Oncology，Shangqiu Central Hospital，Shangqiu，476000，China）

ObjectivesTo study the relationship between Skp2 protein expression and its clinical pathological features in lung cancer tissue.Methods78 wax specimens selected from lung cancer patients who had been diagnosed after pathological examination in our hospital during March 2012 and March 2015 were studied.Meanwhile，30 normal lung tissue specimens selected from healthy people who had been examined in our hospital during the same period were studied.The immunohistochemical methods were chosen to detest all the specimens.Compare the Skp2 protein expression in normal lung tissue and lung cancer tissue as well as the relationship between Skp2 protein expression and its clinical pathological features.ResultsThe positive rate of Skp2 protein expression in lung cancer tissue（44.9%）was significantly higher than in normal lung cancer tissue（6.7%）（P＜0.05）.The positive expression of Skp2 protein was in correlation with the differentiated degree of lung cancer tissue，TNMT stages and lymphatic metastasis（P＜0.05）.ConclusionSkp2 protein has close correlation with the occurrence and development of lung cancer.It also takes part in the invasion and metastasis of lung cancer tissue.Thus，it is of great important to judge the prognosis of lung cancer patients.

Lung cancer；Skp2；Immunohistochemical

R734.2

A学科分类代码：32067

1001-8131（2017）03-0214-02

2016-11-30