摘要 [目的]从成熟油菜种子中抽提出高质量的RNA。[方法]该研究通过将天根植物总RNA提取试剂盒与康为世纪植物总RNA提取试剂盒相结合，使用β-巯基乙醇抑制酚类物质氧化，DNA酶去除DNA，并采用吸附柱有效去除多糖类物质等措施，对油菜种子RNA的提取方法进行有效改进。[结果]采用该方法能提取出质量高且完整性好的RNA，可一次满足后续分子生物学研究的要求。[结论]该研究提出了一种高效快捷的成熟油菜种子RNA提取方法。

关键词 油菜；成熟种子；RNA提取

中图分类号 S565.4 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）13-0143-02

Improvement of RNA Extraction Method from Mature Rapeseeds

GU Si-kai1，2，CHEN Gui-min2，ZHAO Wen-jun2，JI Li-lian1，2* et al

（1.College of Food Science and Engineering， Yangzhou University， Yangzhou， Jiangsu 225127；

2.Jiangsu Collaborative Innovation Center of Ragional Modern Agriculture and Enverinment Protection， Jiangsu Key Laboratory for Eco-agricultural Biotechnology around Hongze Lake， School of Life Science， Huaiyin Normal University， Huaian， Jiangsu 223300）

Abstract [Objective]To extract high quality RNA from mature rapeseeds.[Method]To improve the RNA extraction method of mature rapeseeds by using two RNA extraction kits， which include RNA plant plus reagent from TIANGEN and CW2598M from KANGWEI， meanwhile， adding β-mercaptoethanol to inhibit the oxidation of phenolic compounds and removing DNA by DNase， using the adsorption column to remove polysaccharides etc. [Result]This method can get RNA with high quality， which can satisfy the requirements of subsequent molecular biology research.[Conclusion]The study provides an efficient method for extracting RNA from mature rapeseeds.

Key words Rape；Mature seeds；RNA extraction

RNA提取技術不仅是分子生物学的重要组成部分，而且是功能基因组学的基础[1]，提取高纯度、高完整度的植物组织RNA是进行基因克隆、RNA序列分析、狭线杂交以及构建cDNA文库研究的前提[2-3]。因此，如何快速高效地获得高质量的RNA成为科研人员关注的问题。

油菜是世界四大油料作物之一，成熟油菜种子中含有大量的脂肪、蛋白质、色素、单宁、多酚等物质，丰富的多酚类物质在RNA提取过程中易形成沉淀并发生褐化反应，同时抑制酶的活性等[4-5]。目前已经报道的RNA提取方法主要包括Trizol法[6]、皂土法[7]、Licl-尿素法[8]、改进SDS法[9]及CTAB法[10]等，这些方法都具有一定的局限性，特别对于次级代谢产物丰富、油脂及蛋白含量较高的材料，在总RNA提取过程中往往存在褐化、降解、低纯度等现象[4，11-12]。针对目前油菜种子RNA提取存在的问题，该研究在前期工作的基础上[2]通过多次试验探索，提出了一种高效快捷的油菜种子RNA提取方法。……