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人瘢痕疙瘩间充质样干细胞向成骨细胞分化过程中Notch信号表达的研究

2017-07-01梁钦博邓呈亮魏在荣王波张文夺王达利

中国美容整形外科杂志 2017年2期
关键词:信号

梁钦博 邓呈亮 魏在荣 王波 张文夺 王达利

人瘢痕疙瘩间充质样干细胞向成骨细胞分化过程中Notch信号表达的研究

梁钦博 邓呈亮 魏在荣 王波 张文夺 王达利

目的 研究人瘢痕疙瘩间充质样干细胞向成骨细胞分化过程中,Notch 1~4受体的表达情况,探讨Notch信号通路是否参与调控人瘢痕疙瘩间充质样干细胞的成骨分化。方法 经患者知情同意后,分离培养人瘢痕疙瘩间充质样干细胞,采用流式细胞术检测CD29、CD34、CD44、CD45及CD90的表达;免疫细胞化学法检测Oct 4的表达;体外诱导其向成骨细胞分化,诱导3周后行茜素红染色;于诱导前及诱导后2、3周,采用实时定量-多聚酶链反应(RT-PCR)及免疫蛋白印迹法(western blot),分别检测细胞Notch 1~4受体mRNA及蛋白的表达。结果 流式细胞术结果表明,分离培养的细胞高表达间充质干细胞表型 CD29(98.76%)、CD44(98.11%)、CD90(97.86%),不表达造血干细胞表型 CD34(0.05%)、CD45(0.03%);免疫细胞化学法检测多能干细胞标志物Oct4呈阳性表达;向成骨细胞体外诱导3周后,茜素红染色可见明显的钙盐结节。RT-PCR和western blot结果显示,随着诱导时间的延长,Notch 1~4受体mRNA和蛋白的相对表达量逐渐减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 在人瘢痕疙瘩间充质样干细胞向成骨细胞诱导分化过程中,Notch受体信号的表达逐渐减弱,低水平的Notch信号激活可能有利于瘢痕疙瘩间充质样干细胞的成骨分化。

瘢痕疙瘩;间充质干细胞;Notch信号通路;成骨分化

瘢痕疙瘩是人体真皮损伤后引发或自发产生 的以胶原及细胞外基质异常沉积所致的过度瘢痕化,目前尚无理想的治疗方法。……

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