卢莹+田燕+王莉+杨耀+姚晓林

摘 要 构建了一种可再生型三磷酸腺苷（ATP）适配体计时库仑电化学传感器。将一条短链DNA通过AuS键自组装固定在电极表面， ATP的核酸适配体与该短链DNA杂交而结合在电极表面。带负电的DNA通过静电吸引结合电解液中的六氨合钌（RuHex）阳离子。当传感器和靶分子ATP孵育后，ATP与核酸适配体结合，使适配体链从电极表面解离，电极表面吸附的DNA量减少，结合RuHex的量随之降低。通过计时库仑技术检测RuHex响应信号降低的量 ，可以对ATP进行定量测定。此传感器的电化学响应信号与ATP浓度对数值呈线性关系，线性检测范围为0.001～100 μmol/L，检出限（S/N=3）为0.5 nmol/L。此传感器检测靶分子ATP后，可以通过简单的操作步骤再生，再生5次后的响应信号为初始信号的90%以上。采用此传感器检测大鼠脑透析液中ATP的含量为（19.2±3.7） nmol/L （n=3）。

关键词 核酸适配体； 计时库仑； 传感器； 三磷酸腺苷； 再生

1 引 言

生物传感技术在疾病预警与诊断、临床治疗等方面具有良好的应用价值[1～3]。许多生理和病理过程相关的生物活性分子在人体内含量低、易降解、难于被检测，因此开发和筛选选择性好、灵敏度高的识别元件一直是相关研究者关注的热点[4～6]。核酸适配体作为一种新型生物传感识别元件，被越来越多地应用于基础和应用研究[7～10]。核酸适配体是通过系统配体进化技术筛选得到的特定序列的DNA或RNA寡核苷酸链，与靶标之间具有高选择性和强亲和力，某些靶标分子与核酸适配体之间的选择性和亲和力甚至强于其天然配体[11～13]。……