陈敏捷， 吴清明

武汉科技大学医学院，湖北 武汉 430000

论著·胃癌

GRP78在胃癌中表达水平及沉默表达后对人胃癌SGC-7901/DDP细胞增殖和凋亡的影响

陈敏捷， 吴清明

武汉科技大学医学院，湖北 武汉 430000

目的研究内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78, GRP78)在人不同胃组织(正常胃组织和胃癌组织)和细胞(正常胃上皮GES1细胞、胃癌SGC-7901细胞、多耐药性胃癌SGC-7901/DDP细胞)中的表达水平；揭示GRP78沉默表达对SGC-7901/DDP细胞增殖和凋亡的影响。方法利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和免疫印迹(Western blotting)方法分别检测人正常胃组织、胃癌组织、人正常胃上皮GES1细胞、胃癌SGC-7901细胞、多耐药性胃癌SGC-7901/DDP细胞中GRP78 mRNA和蛋白表达水平。利用LipfectamineTM2000将GRP78 siRNA转染至SGC-7901/DDP细胞中，同时设置未转染Control组和无义转染Control siRNA组。Real-time PCR和Western blotting方法检测各组SGC-7901/DDP细胞转染效率；MTT方法检测各组SGC-7901细胞的生长活力变化和不同浓度顺铂DDP作用下细胞增殖抑制率；流式细胞术检测各组SGC-7901细胞凋亡情况。结果胃癌组织中GRP78 mRNA和蛋白表达水平显著高于正常胃组织(P<0.05)；多耐药性胃癌SGC-7901/DDP细胞中GRP78 mRNA和蛋白表达水平显著高于胃癌SGC-7901细胞和正常胃上皮GES1细胞(P<0.05)；GRP78 siRNA转染SGC-7901/DDP细胞后GRP78 mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05)；与Control组和Control siRNA组相比，GRP78 siRNA转染组SGC-7901/DDP细胞生长活力显著下降，DDP作用下细胞增殖抑制率和细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。结论GRP78 mRNA和蛋白在胃癌组织中高表达，在多耐药性胃癌SGC-7901/DDP细胞中也高表达，证实GRP78在胃癌中发挥促癌基因的作用。而GRP78 siRNA转染能够沉默SGC-7901/DDP细胞中GRP78基因表达，抑制SGC-7901/DDP细胞增殖并促进细胞凋亡。

葡萄糖调节蛋白78；胃癌；细胞增殖；细胞凋亡；SGC-7901/DDP

葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78，GRP78)又称免疫球蛋白重链结合蛋白，是位于细胞内质网上重要的分子伴侣，属于热休克蛋白HSP70家族中一员，而GRP78分子基因和蛋白序列结构在许多物种中保持高度保守性[1]。GRP78在各种肿瘤的发生、发展中均发挥重要作用，且在多种恶性肿瘤中呈高表达，并与多种化疗药物的耐受性相关[2]。胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，近年来其发病率呈上升趋势，而其病死率也居恶性肿瘤第2位[3]。而临床研究[4]表明相当部分患者是因为胃癌的恶性增殖导致肿瘤无法控制最终死亡。……