孙银萍，王福立

(淄博市中心医院，山东淄博255000)

级联激活的免疫细胞联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌效果观察

孙银萍，王福立

(淄博市中心医院，山东淄博255000)

目的 观察级联激活的免疫细胞(CAPRI细胞)联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效与安全性。方法 将60例晚期NSCLC患者随机分为治疗组31例和对照组29例，治疗组给予化疗+CAPRI细胞治疗，对照组仅给予化疗。观察两组临床疗效和不良反应，比较治疗前后血清肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞相关抗原(SCC)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的变化。结果 治疗组和对照组的客观有效率分别为54.8%和41.4%，组间比较P>0.05；两组疾病控制率分别为90.3%和72.4%，组间比较P<0.05。两组腺癌患者血清CEA及鳞癌患者血清SCC、CYFRA21-1与治疗前比较均下降，组内比较P<0.05；治疗组中腺癌患者治疗后血清CEA及鳞癌患者治疗后血清SCC、CYFRA21-1与对照组治疗后血清CEA、SCC、CYFRA21-1比较均下降，组间比较P<0.05。两组白细胞下降、贫血、血小板下降、恶心呕吐、肝肾功能损伤的发生率比较，P均>0.05。结论 CAPRI细胞联合化疗能够提高晚期NSCLC患者的疾病控制率，降低肿瘤标志物水平，安全性好。

非小细胞肺癌；级联激活的免疫细胞；癌胚抗原；鳞状上皮细胞相关抗原；细胞角蛋白19片段

化疗是晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的主要治疗手段之一[1]。近年来，肿瘤免疫治疗逐渐受到人们的关注，免疫治疗在肺癌治疗中的应用逐渐增多[2，3]。级联激活的免疫细胞(CAPRI细胞)是一种新型的肿瘤免疫治疗方法，它是应用患者的外周血淋巴细胞经活化刺激后获得，对肿瘤细胞具有特异性杀伤功能[4]。目前CAPRI细胞在肺癌治疗中的应用较少。本研究对晚期NSCLC患者给予化疗联合CAPRI细胞治疗，观察其疗效与不良反应，并观察治疗前后血清肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞相关抗原(SCC)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的变化。

1 资料与方法

1.1 临床资料 入选标准：①经纤维支气管镜或穿刺活检病理检查证实为鳞癌或腺癌；②根据美国肿瘤研究联合委员会(AJCC)制定的第7版癌症分期标准，符合Ⅲ～Ⅳ期；③初治；④CT和(或)MRI显示的可测量病灶直径≥10 mm；⑤治疗前血常规、肾功能、肝功能及心电图正常；⑥KPS评分≥70分，预计生存时间≥6个月。选取淄博市中心医院2014年4月～2016年3月收治的晚期NSCLC患者60例，男33例、女27例,年龄35～69岁。采用随机数字表法将患者分为治疗组31例和对照组29例，两组性别、年龄、KPS评分、病理类型及临床分期具有可比性。本研究经我院伦理委员会批准，患者均签署知情同意书。

1.2 治疗方法 治疗组给予CAPRI细胞联合化疗治疗，对照组仅给予化疗。

1.2.1 化疗方法 鳞癌患者采用吉西他滨+顺铂方案。吉西他滨1 000 mg/m2静滴30 min，第1、8天；顺铂25 mg/m2，第1～3天；21 d为一周期。腺癌患者采用培美曲塞+顺铂方案。培美曲塞500 mg/m2静滴超过10 min，第1天；顺铂75 mg/m2，培美曲塞滴注结束后30 min开始滴注，滴注时间超过2 h，第1天；21 d为一周期。

1.2.2 CAPRI细胞治疗方法 应用COBE Spectra血细胞分离机(美国COBE公司)采集患者外周血单个核细胞40 mL，将其稀释至200 mL，平均分配到8个离心管中，反复离心，将得到的细胞装入培养瓶，加入12 mL淋巴细胞悬液，置于37 ℃、5% CO2培养箱中培养3 h，后在培养物中加入CAPRI专利试剂后继续培养3 h，完成CAPRI细胞的第一步激活；在激活的培养物中再加入淋巴细胞悬液12 mL，在上述相同条件下培养16 h，完成第二步激活。然后将得到的细胞计数、离心后再加入CAPRI专利试剂培养72 h，离心，去上清，得到CAPRI细胞。将CAPRI细胞进行细胞表型、病毒、细菌学及真菌检测无异常后，-80 ℃保存待用。于化疗结束后1周进行CAPRI细胞回输，回输前再次进行细胞表型、病毒、细菌学及真菌检测，无异常后采用静滴方式回输，隔日1次，每个疗程共回输12次。

1.3 近期疗效评价方法 治疗前及治疗结束后2个月行强化CT观察瘤体变化，按照RECIST标准[5]评价近期疗效。完全缓解(CR)：全部病灶消失，维持4周以上；部分缓解(PR)：病灶缩小至少30%，维持4周以上；稳定(SD)：介于PR和PD之间；进展(PD)：病灶增加超过20%，或出现新病灶。如初步评价为PR或CR，则于4周后再次评价确认。以CR+PR计算客观有效率，以CR+PR+SD计算疾病控制率。不良反应评价按照美国国立癌症研究所通用毒性标准(NCI-CTC)3.0版[6]。输注CAPRI细胞过程中及回输后观察有无发热、皮疹、过敏等不良反应。

1.4 肿瘤标志物检测方法 治疗前及治疗结束后采集患者静脉血，分离血清，采用E170电化学发光免疫分析仪及配套试剂盒检测血清CEA、SCC、CYFRA21-1水平。

1.5 统计学方法 采用SPSS17.0统计软件。组间计量资料比较采用t检验，计数资料比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组近期疗效比较 治疗组共完成化疗168个周期，对照组共完成化疗165个周期。治疗组CR 0例，PR 17例，SD 11例，PD 3例，客观有效率为54.8%，疾病控制率为90.3%；对照组CR 0例，PR 12例，SD 9例，PD 8例，客观有效率为41.4%，疾病控制率为72.4%。两组客观有效率比较差异无统计学意义(P>0.05)，治疗组疾病控制率高于对照组(P<0.05)。

2.2 两组治疗前后血清肿瘤标志物水平比较 治疗组腺癌患者治疗前后血清CEA水平分别为(44.12±35.47)、(18.40±12.25)ng/mL，对照组分别为(43.09±30.73)、(29.25±10.51)ng/mL，两组治疗后血清CEA水平均显著下降(P均<0.05)，且治疗组低于对照组(P<0.05)。两组鳞癌患者治疗前后血清SCC、CYFRA21-1水平比较见表1。

2.3 两组不良反应比较 治疗组出现白细胞下降15例(48.4%)、贫血10例(32.3%)、血小板下降5例(16.1%)、恶心呕吐16例(51.6%)、肝肾功能损伤5例(16.1%)；对照组分别为16例(55.2%)、8例(27.6%)、4例(13.8%)、18例(62.1%)、4例(13.8%)。两组白细胞下降、贫血、血小板下降、恶心呕吐、肝肾功能损伤的发生率比较差异无统计学意义(P均>0.05)。治疗组应用CAPRI细胞治疗过程中未出现发热、寒战及过敏等不良反应。

表1 两组鳞癌患者治疗前后血清SCC、CYFRA21-1水平比较

注：与同组治疗前比较，*P<0.05；与对照组治疗后比较，△P<0.05。

3 讨论

生物免疫治疗是继手术、放疗和化疗后的第四种肿瘤治疗模式，广泛用于晚期肿瘤的治疗[7]。生物免疫治疗常与放化疗联合使用，可以提高放化疗的疗效，降低放化疗的不良反应。CAPRI细胞是过继性细胞免疫治疗(ACI)的常用方法[8]，其利用抗原递呈细胞结合抗CD3单克隆抗体及特定细胞因子,然后经两步法链式反应激活后获得。CAPRI细胞的杀伤范围几乎涵盖所有肿瘤细胞，其效应细胞不仅包括NK样T细胞、NK细胞和少量DC细胞，还包括大量CD4+和CD8+T辅助细胞(Th)和细胞毒T细胞(CTL)，其中NK样T细胞能杀伤占人类肿瘤细胞20%的非MHC限制型肿瘤细胞，而Th和CTL细胞的杀伤是一种典型的特异性杀伤，能杀伤占人类肿瘤细胞80%的MHC限制型肿瘤细胞。

CAPRI细胞对肿瘤细胞的作用机制包括：CAPRI细胞可以分泌肿瘤坏死因子(TNF)、干扰素(IFN-γ)及IL-2、IL-6等多种抗肿瘤的细胞因子;诱导肿瘤细胞的凋亡；通过NK样T细胞和Th、CTL的杀伤作用诱导肿瘤细胞裂解[9]。研究显示，CAPRI细胞可以恢复肿瘤细胞表面隐藏的抗原，使其更容易被CAPRI细胞识别和杀伤[10]。国外研究发现，CAPRI细胞能够提高化疗的效果，同时增强患者对放化疗的耐受能力，提高其生存质量[11]。国内研究显示，三阴性乳腺癌术后患者[12]、结肠癌术后患者[13]采取化疗联合CAPRI治疗后，复发率明显降低，生存率明显升高。桑圣刚等[14]报道，CAPRI治疗可减少恶性胸腔积液患者的胸水量。本研究中，治疗组的客观有效率与对照组相近，而疾病控制率显著高于对照组，表明CAPRI可以提高晚期NSCLC的近期疗效。两组客观有效率没有统计学差异的原因可能与样本量少有关。

肺癌标志物CEA、SCC及CYFRA21-1是由肺癌细胞异常产生或是机体对肿瘤的刺激反应而产生的物质。CEA是肺腺癌的特异性血清标志物，对晚期肺癌的疗效评价和监测NSCLC的复发具有重要作用[15]；CYFRA21-1是鳞癌的血清肿瘤标志物,也是NSCLC的独立预后因素之一[16]；血清SCC水平可用于鳞癌的鉴别诊断，与CYFRA21-1联合应用可判断肺鳞癌预后和监测疾病进展[17]。本研究显示，治疗组和对照组中腺癌患者治疗后血清CEA、鳞癌患者治疗后血清SCC和CYFRA21-1均较治疗前下降，且治疗组较对照组更低。分析肿瘤标志物下降的原因可能与患者经治疗后肿瘤缩小，产生肺癌标志物的癌细胞减少有关。

综上所述，CAPRI细胞联合化疗能够提高晚期NSCLC患者的疾病控制率，降低肿瘤标志物水平，安全性好。

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山东省淄博市科学技术发展计划资助项目(2014kj010217)。

王福立(E-mail: 1262223640@qq.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.06.016

R734.2

B

1002-266X(2017)06-0048-03

2016-10-08)