何淑玲 赵垦田 马令法 杨敬军 常毓巍

（1西藏农牧学院高原生态研究所，西藏林芝860000；2甘肃民族师范学院高寒生态系统研究所，甘肃合作747000）

羊肚菌（Morchella spp），属子囊菌亚门（Aseomy⁃cotina），盘菌纲（Discomycetes），盘菌目（Pezizales），羊肚菌科（Morchellaceae），羊肚菌属（Morchella）[1]，享有“世界上最珍贵的稀有食用菌”之名，具有很高的滋补效果。它香味独特、功能齐全，含有丰富的人体必需氨基酸、多种维生素、碳水化合物及蛋白质，因其菌盖似羊肚而得名[2]。羊肚菌具有提神、醒脑、补肾等功效，并且在医疗保健领域也有重要的作用[3]，此外羊肚菌，药性平和、味道甘甜，是很好的中药材，有消食、益肠道及健脾胃等功效[4]，在食品、药品、化妆品等方面有很大的开发利用价值[5]。目前对羊肚菌的研究较多，主要集中在对菌丝和菌核、保健、药理、生物学特性、多糖提取等方面[6-12]，有关培养料配方对羊肚菌生长及品质的作用鲜有报道[13-16]。为此笔者对三级菌种不同培养料配方对羊肚菌生长及品质的影响进行了全面研究，为进一步确定羊肚菌生长的最佳栽培种培养料配方提供理论依据，也为提高羊肚菌产量和品质提供科学基础。

1 材料与方法

1.1供试原料与器具（1）原料：石膏、杂木屑、石灰、麸皮、蔗糖、草木灰、Ca（H2PO4）2、催菇剂、KH2PO4、MgSO4、75%酒精及羊肚菌基脚土（取自甘肃民族师范学院食用菌引种驯化基地采收羊肚菌3潮的0～30 cm的土壤）。

（2）仪器：人工气候箱、分析天平、恒温干燥箱、电热炉、研钵、索氏提取器、全自动定氮仪等。

1.2试验配方及三级种制备

1.2.1 培养料配方 配方1：杂木屑74%，麸皮20%，KH2PO41%，MgSO41%，羊肚菌基脚土1%，石膏1%，石灰1%，Ca（H2PO4）21%。配方2：杂木屑74%，麸皮20%，KH2PO41%，MgSO41%，催菇剂1%，石膏1%，石灰1%，Ca（H2PO4）21%。配方3：杂木屑74%，麸皮20%，KH2PO41%，MgSO41%，草木灰1%，石膏1%，石灰1%，Ca（H2PO4）21%。配方4：杂木屑74%，麸皮20%，KH2PO41%，MgSO41%，蔗糖1%，石膏1%，石灰1%，Ca（H2PO4）21%。

封口料共设1个配方：羊肚菌基脚土75%，麸皮15%，木屑10%。

1.2.2 三级种的制备 按不同配方比例称好原料后将杂木屑、麸皮、羊肚菌基脚土、石灰、石膏等混合均匀，将蔗糖、KH2PO4、MgSO4、Ca（H2PO4）2一起加少许水溶解后，均匀的洒在已混合的料堆上，加水搅拌均匀，培养料捏在手里既不会流出水，又不会碎成渣为宜；同时将封口料混合后加水搅拌均匀，同样捏在手里既不会流出水，又不会碎成渣为宜。将拌好的培养料装入750 mL食用菌专用瓶，上端用封口料封口。再将培养料在0.12 MPa，120℃高温高压灭菌60 min。待灭菌后的培养料温度降低后，将培养料和接种所用器具一起放入超净工作台，紫外线灭菌30 min后开始接种，用接种铲取蚕豆大小供试二级菌种，接入到培养料中。每个配方接种15～20瓶，最后将接种好的培养料瓶置于恒温培养箱23℃恒温黑暗培养，等菌核长满即可。

1.3栽培方法试验采用田间随机区组法，2016年9月25日将菌种播种于温室大棚中，小区面积为3 m×4 m，一个小区播种同种配方培养料12瓶种，每个培养料配方重复3次。

1.4测定指标与方法（1）菌盖长（cm）：用游标卡尺测量被标记的10株羊肚菌的菌盖长，取其平均值。（2）菌盖周长（cm）：用游标卡尺测量被标记的10株羊肚菌的菌盖直径，算出周长，取其平均值。（3）菌柄长（cm）：用游标卡尺测量被标记的10株羊肚菌的菌柄长，取其平均值。（4）菌柄周长（cm）：用游标卡尺测量被标记的10株羊肚菌的菌柄直径，算出周长，取其平均值。（5）单株鲜重（g）=三潮菇的总鲜重/采摘的三潮菇的总株数。（6）单株干重（g）=三潮菇的总干重/采摘的三潮菇的总株数。（7）小区鲜产量（kg）=单株鲜重×平均每个小区采摘的三潮菇的株数/1000。（8）小区干产量（kg）=单株干重×平均每个小区采摘的三潮菇的株数/1000。

（9）灰分（%）=（W2-W0）/（W1-W0）×100

式中：W2-炭化后瓷坩埚加灰分质量（g），W0-恒重空瓷坩埚质量（g），W1-瓷坩埚加试样质量（g）[17]。

（10）粗纤维（%）=（m1-m0）/m×100

式中：m0-瓷坩埚质量（g），m1-瓷坩埚加粗纤维的质量（g），m-试样用量（g）[17]。

（11）粗蛋白质、氨基酸及总糖含量测定[17-18]。

1.5数据分析试验数据采用DPS7.05统计软件进行方差分析。

2 结果与分析

2.1不同配方栽培种对羊肚菌菌盖变化的影响表1结果表明，供试4个配方栽培种的羊肚菌子实体菌盖生长势都较好，至2015年12月17日时菌盖长为2.7～5.1 cm，菌盖周长为10.7～15.7 cm。可以看出，在羊肚菌全生长发育期配方1的菌盖生长都最快，菌盖和菌盖周长比最慢的配方4的增加了42.10%和46.73%。

表1 不同栽培种配方对羊肚菌菌盖变化的影响

2.2不同栽培种配方对羊肚菌菌柄生长的影响表2结果显示，研究4个栽培种配方的羊肚菌子实体菌柄生长均正常且长势也较好，至2015年12月17日时菌柄长为4.0～5.7 cm，菌盖周长为6.2～8.1 cm，可以看出，在整个生长发育期配方1的菌柄生长最快也最粗，配方4的菌柄生长最慢也最细。配方1的菌柄长和菌柄周长比配方4的增加42.50%和30.65%。

表2 不同栽培种配方对羊肚菌菌柄变化的影响

2.3不同栽培种配方对子实体鲜重变化的影响由表3可见，在同一生长时期，羊肚菌鲜子实体均表现出配方1的最重，配方4的最轻，4个配方的平均单株鲜重依次为配方1＞配方2＞配方3＞配方4。2015年12月17日时子实体达到采收标准，4个配方的子实体单株鲜重都达到了最大，且配方1的最高为28.28 g，配方4的最低为9.74 g，两者间差异极显著，其它各配方之间差异显著。

表3 不同栽培种配方对羊肚菌鲜重的影响

表4 不同栽培种配方对羊肚菌干重的影响

2.4不同栽培种配方对子实体干重的影响由表4可见，在同一生长时期，羊肚菌子实体单株干重配方1的最高，配方4的最低，4个配方的子实体平均单株干重依次为配方1＞配方2＞配方3＞配方4。2015年12月17日时子实体生长达到采收标准，4个配方的子实体平均单株干重都达到了最高，且配方1的最高为3.67 g，配方4的最低为1.39 g，两者之间差异极显著，配方2与配方3差异不显著，配方3与配方4差异显著。

2.5不同栽培种配方对羊肚菌产量的影响由表5可见，4个配方中配方1羊肚菌小区采收数最多为77.09株，单株鲜、干重也都最高，产量也最高，子实体每小区产量（鲜品）为4.47 kg、干品为0.71 kg，配方4小区采收数、单株鲜、干重也都最小，产量等都比配方1低。各配方之间小区采收数、产量差异均达极显著水平。

表5 不同栽培种配方对羊肚菌产量的影响

表6 不同栽培种配方对羊肚菌品质的影响

图1 配方1菌霜长势

图2 配方1子实体长势

图3 配方4菌霜长势

图4 配方4子实体长势

2.6不同栽培种配方对羊肚菌品质的影响由表6可见，4种培养料配方的羊肚菌灰分和粗纤维含量都是菌盖＜菌柄，且配方1最低，灰分含量和粗纤维含量菌盖为6.07%，12.19%，菌柄为7.40%，15.27%。配方4最高，灰分含量和粗纤维含量菌盖为6.16%，25.24%，菌柄为7.81%，15.91%。其顺序为配方1＜配方2＜配方3＜配方4，且配方1与配方4之间差异极显著。总糖含量、粗蛋白含量和氨基酸总量都是菌盖＞菌柄，其顺序为配方1＞配方2＞配方3＞配方4，且配方1与配方4之间差异极显著，不同栽培种配方羊肚菌品质依次为配方1＞配方2＞配方3＞配方4。

3 小结与讨论

供试的4个培养料配方中，配方1对羊肚生长的影响最大，在形态特征方面表现为菌盖和菌柄都最长、最粗，小区子实体采收数、单株鲜重、单株干重和小区产量都最高，其顺序依次为配方1＞配方2＞配方3＞配方4。在羊肚菌子实体的品质方面配方1的羊肚菌灰分含量、粗纤维含量最少，其顺序依次为配方1＜配方2＜配方3＜配方4；而配方1的多糖、蛋白质和氨基酸总量最高，其顺序依次为配方1＞配方2＞配方3＞配方4，所以配方1羊肚菌子实体的品质较好，而配方4的羊肚菌灰分含量最多，多糖、蛋白质、粗纤维含量最少，品质较差。三级菌种不同培养料配方对羊肚菌生长及品质的影响依次为配方1＞配方2＞配方3＞配方4。程远辉等[19]研究表明每公顷羊肚菌最高干重135 kg，与本研究结果不一致的原因可能是出菇期的管理和配方中缺少无机盐等因素所致。申时才等[20]认为：种植过羊肚菌的土壤比没种植过羊肚菌的产量高，这一研究结果或许可以用来解释为何羊肚菌子实体在栽培种培养料中加入羊肚菌基脚土后其生长更好、更健壮。

试验表明加入羊肚菌基脚土的配方，羊肚菌子实体菌盖、菌柄生长最好，单株鲜重、单株干重、折合每公顷鲜产量、折合每公顷干产量最高，品质也是4个配方中最好的。因此添加羊肚菌基脚土的栽培种培养料配方为羊肚菌生长的最佳配方，这为羊肚菌今后的连作研究提供了实践依据。至于为什么在培养料中加入羊肚菌基脚土能提高羊肚菌的产量和品质的生理机理，这将是今后进一步深入研究的内容和方向。