徐瑶瑶, 李思琪, 田雪梅

(华南师范大学生命科学学院, 广州510631)

三种不同固定液对小鼠组织过碘酸雪夫染色效果比较

徐瑶瑶, 李思琪, 田雪梅

(华南师范大学生命科学学院, 广州510631)

目的 比较小鼠肝脏、肾脏、小肠三种组织在质量分数4%多聚甲醛液、Carnoy’s液、Bouin’s液三种固定液不同固定时间下的制片质量和过碘酸雪夫染色(PAS)效果，筛选出一种最为适用的固定方法。方法 取成年雄性C57BL/6小鼠肝脏、肾脏、小肠，分别固定于三种固定液，固定时间分别是质量分数4%多聚甲醛液: 24 h、48 h、72 h; Carnoy’s液: 4 h、8 h、12 h; Bouin’s液：12 h、24 h、48 h，充分固定后，常规制作石蜡切片，然后进行PAS染色，对比观察染色效果。结果 三种固定液对不同组织、不同固定时间下PAS染色结果存在差异。肝脏、肾脏、小肠经Carnoy’s液处理12 h后PAS效果最佳，质量分数4%多聚甲醛液固定24 h基本满足观察检测效果，而经Bouin’s液固定组织染色效果相对较差。结论 PAS反应对固定液和固定时间具有选择性, Carnoy’s 液是组织进行PAS染色的理想固定液，但从固定效果、重复性、安全性、成本等多因素综合考虑，在PAS反应中，质量分数4%多聚甲醛液可以替代Carnoy’s液。

Carnoy’s液; Bouin’s液; 多聚甲醛; 过碘酸雪夫(PAS)染色

过碘酸雪夫(PAS)染色(periodic acid-Schiff stain),是一种常见的组织化学染色方法，主要用于检测多糖和糖蛋白, 现已广泛应用于病理学诊断和鉴别。研究表明[1,2], PAS反应对固定液具有选择性，从而影响制片质量和染色效果。目前固定液的种类很多, Carnoy’s液作为PAS反应的经典固定液, 却存在配制麻烦、重复率低、成本高、不适用免疫组化研究等问题。多聚甲醛(Paraformaldehyde)是目前实验室最常用的固定剂之一, 该固定剂较为温和, 能很好地保存组织的抗原性和细微结构, 适于组织标本和细胞片的较长期保存, 也非常适合组织和细胞的光学显微镜免疫化学研究[3]。……