应诗家，戴子淳，郭佳佳，施振旦

（江苏省农业科学院畜牧研究所动物品种改良和繁育重点实验室，南京 210014）

LPS对鹅等级卵泡基质层TLR家族基因表达的影响

应诗家，戴子淳，郭佳佳，施振旦

（江苏省农业科学院畜牧研究所动物品种改良和繁育重点实验室，南京 210014）

【目的】研究鹅卵泡基质层TLR家族基因表达谱及其对LPS不同处理时间后的反应性。【方法】在大群散养条件下，实时观察鹅产蛋过程，分别在产蛋后8和2 h以及产前4、16和28 h注射LPS，并在产蛋后8h屠宰，即LPS作用0、6、12、24和36 h，每个时间点各5只鹅。屠宰时，取卵巢，观察卵泡外观形态，并分离F1 -F5级卵泡基质层。试验鹅自由饮水、自由采食、自然光照。LPS处理0、24和36 h的单个F1-F5级卵泡基质层或卵泡用于基因表达分析，而其他LPS处理的每只鹅等级卵泡基质层RNA等质量混合后用于基因表达分析。采用普通PCR方法检测10种鸟类TLR家族基因的在鹅等级卵泡基质层的表达谱，其中以脾脏组织为阳性对照，以不加cDNA模板为阴性对照。根据RT-PCR的表达谱结果，采用Real-time PCR检测不同等级卵泡基质层TLRs表达水平以及不同LPS处理时间对基质层TLRs表达水平的影响。对不同等级卵泡和不同LPS处理时间对基质层TLRs表达的数据，采用单因子方差分析，Duncan法多重比较；对变性卵泡与对照组基质层TLRs表达水平的数据，采用 T检验分析。【结果】（1）已公开的10种鸟类TLR家族基因，如TLRs 1A、1B、2A、2B、3、4、5、7、15和21基因均在等级卵泡基质层组织中表达。（2）随等级卵泡生长，TLRs 2A和15表达水平逐渐升高；F1级卵泡基质层TLR2A表达水平显著高于F3、F4和F5级卵泡，TLR15表达水平显著高于F5级卵泡；……