张洋，董理，孙源博，李文媛，王莹，孙平，于伟光

(1牡丹江医学院，黑龙江牡丹江 157011；2牡丹江医学院红旗医院)

下调HMGA1对乳腺癌MCF7细胞增殖和侵袭能力的影响及机制

张洋1，董理2，孙源博2，李文媛1，王莹1，孙平1，于伟光2

(1牡丹江医学院，黑龙江牡丹江 157011；2牡丹江医学院红旗医院)

目的观察下调高迁移率族蛋白A1(HMGA1)对乳腺癌MCF7细胞增殖和侵袭能力的影响，并探讨其机制。方法选择人乳腺癌MCF7细胞，将其分为siRNA对照组、siRNA-HMGA1组、miR对照组和miR-24-3p组，分别转染siRNA对照慢病毒、siRNA-HMGA1慢病毒、miR对照慢病毒和miR-24-3p慢病毒。采用Western boltting法检测未转染MCF7、正常乳腺上皮细胞株(HMEC hTERT)及siRNA对照组、siRNA-HMGA1组细胞HMGA1蛋白，实时荧光定量PCR法检测miR对照组和miR-24-3p组细胞HMGA1、miR-142-3p mRNA，MTT法和Transwell法检测4组细胞增殖活力和侵袭能力，荧光素酶报告基因分析验证HMGA1与miR-142-3p靶向关系。结果MCF7、HMEC hTERT细胞中HMGA1蛋白相对表达量分别为0.574±0.075、0.234±0.099，两者相比P<0.01。siRNA-HMGA1组、siRNA对照组HMGA1蛋白相对表达量分别为0.141±0.051、0.651±0.136，两组相比P<0.01。miR-142-3p组、miR对照组HMGA1 mRNA相对表达量分别为0.135±0.046、0.604±0.156，miR-142-3 mRNA相对表达量分别为1.128±0.174、0.263±0.116，两者相比P均<0.01。MCF7细胞中HMGA1 mRNA、miR-142-3p mRNA表达呈负相关(r=-0.259，P=0.021)。siRNA-HMGA1组、siRNA对照组细胞增殖活力分别为0.535±0.066、1.160±0.125，穿膜细胞数分别为(32.05±9.33)、(71.68±14.39)个，两者相比P均<0.01。miR-142-3p组、miR对照组细胞增殖活力分别为0.362±0.121、1.083±0.139，穿膜细胞数分别为(21.52±6.64)、(46.74±7.82)个，两组相比P均<0.01。miR-142-3p组、miR对照组野生型HMGA1 3′-UTR荧光素酶活性分别为0.668±0.074、1.000±0.000，两组相比P<0.01。结论下调HMGA1乳腺癌MCF7细胞增殖和侵袭能力增强，其机制可能与HMGA1可靶向反向调控miR-142-3p有关。

高迁移率族蛋白A1；微小RNA 142-3p；乳腺肿瘤；细胞增殖；细胞侵袭

乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤，是全球女性因癌症导致死亡的首要原因。乳腺癌高病死率主要原因为肿瘤转移，而肿瘤转移相关基因已被证实参与肿瘤细胞增殖，因此，筛选鉴定肿瘤细胞增殖和转移的生物标志物，对乳腺癌临床治疗具有重要意义[1]。高迁移率族蛋白A1(HMGA1)是一种染色质相关蛋白质。最近研究表明HMGA1为多种恶性肿瘤的致癌基因[2]，其在乳腺癌[3]、胃癌[4]、卵巢癌[5]、非小细胞肺癌[6]、甲状腺癌[7]中表达上调，并促进肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移，其高表达与胃癌[4]和非小细胞肺癌[6]患者的预后呈负相关。本研究前期通过TargetScan软件发现与3′非编码区(3′-UTR)HMGA1序列相匹配microRNAs为miR-142-3p，而miR-142-3p已被证实可作为多种肿瘤的抑癌基因。……