李玖平, 陈利红, 杨浩莹

(1. 西安交通大学医学院附属三二〇一医院 输血科, 陕西 汉中, 723000; 2. 陕西省汉中市第二人民医院 检验科, 陕西 汉中, 723000)



自身免疫性溶血性贫血对输血前血型鉴定、抗体筛查及交叉配血的影响

李玖平1, 陈利红2, 杨浩莹1

(1. 西安交通大学医学院附属三二〇一医院 输血科, 陕西 汉中, 723000; 2. 陕西省汉中市第二人民医院 检验科, 陕西 汉中, 723000)

自身免疫性溶血性贫血; 血型鉴定; 抗体筛查; 交叉配血

输血在抢救自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者过程中起着至关重要的作用，但进行血型鉴定、抗体筛选及交叉配血时确保治疗安全性是仍需解决的问题[1]。AIHA患者的血清中存在全凝集素，血型鉴定比较困难，还有可能使共存的同种抗体难以被检测，交叉配血也不相合，加大输血的风险[2]。本研究对400例AIHA患者的血液标本进行输血前血型鉴定、抗体筛查和交叉配血，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2013—2015年收治的AIHA患者400例，其中男210例，女190例，年龄20～73岁，平均(42.51±2.32)岁; 病程2～6年，平均(3.28±2.13)年。

1.2 检测试剂

谱细胞、抗-A/B血型定型试剂、直接抗人球蛋试剂由上海血液医药生物有限公司提供; LISS/Coombs卡、ABO/RhD血型检测卡等由江阴力博医药生物技术股份公司提供。

1.3 检测方法

① 血型鉴定：采取试管法, DTT处理后红细胞与DAT强阳性红细胞的ABO正定型、RhD血型采取ABO血型定型卡对其进行鉴定[3]。② DTT处理自凝红细胞：采用DTT处理，红细胞悬液保留[4]。③ 自身抗体吸收：采取参考文献[5]中方法处理，吸收后的血清保留。④ 抗体筛选和鉴定：采取盐水介质试管法，检测IgM抗体用自身抗体吸收后的血浆; 检测IgG抗体则采用LISS-IAT法、直接IAT法[6]。⑤ 直接抗人球蛋白试验：采用LISS/Coombs卡等进行交叉配血。

2 结 果

400份AIHA患者血液标本中，温自身抗体有342份(85.50%), 冷自身抗体有23份(5.75%), 混合型自身抗体有35份(8.75%)。血型鉴定结果：① 对ABO正定型、RhD血型干扰及解决方法：针对342份温自身抗体中26份DAT强阳性标本出现红细胞非特异性凝集现象，可选用ABO血型卡; 而23份冷自身抗体和35份混合型自身抗体则因红细胞自凝受影响, 9份(15.52%)在37 ℃温盐水中洗涤3遍, 13份(22.41%)用DTT处理红细胞, 36份(62.07%)再使用ABO血型卡。② 对ABO反定型的干扰及解决方法: 342份温自身抗体无干扰; 23份冷自身抗体和35份混合型自身抗体因Ac、Bc、Oc均产生凝聚从而受影响, 40份(68.97%)试管法, 37 ℃温度下水浴孵育15 min, 18份(31.03%)自身抗体吸收后再试管法。

342份温自身抗体型 AIHA 患者的抗体鉴定结果: 342份温自身抗体筛选呈阴性; 51份在LISS/Coombs卡中反应特异性, 47份有强弱之分。对51份有特异性的患者血浆采用LISS/Coombs法做抗体鉴定; 对其余患者血浆、自身抗体吸收后的血浆采用直接IAT法做抗体鉴定，结果显示，无特异性自身抗体244份(71.35%), 抗体特异性为全凝集素; 有特异性自身抗体51份(14.91%), 抗体特异性为自身抗-D 7份、抗-Ce 39份、抗-M 2份、抗-Jka3份; 自生抗体+同种抗体47份(13.74%), 抗体特异性为同种抗-Ce 22份、抗-C 3份、抗-e 2份、抗-c E0份、抗-c 2份、抗-E 3份、抗-M 2份、抗-Jka2份、抗-Jkb1份。

23份冷自身抗体筛选呈阳性; 其中3份在LISS/Coombs卡中反应也呈阳性。对其血浆做IgM类和IgG类抗体鉴定，结果显示，无特异性自身抗体17份(73.91%), 抗体特异性为全凝集素(IgM, 3份37 ℃有反应性); 有特异性自身抗体6份(26.09%), 抗体特异性为自身抗-HI 4份、抗-I 2份(IgM, 37 ℃均无反应性); 自生抗体+同种抗体0份(0%), 抗体特异性为无。

35份患者血浆进行抗体筛选，室温下呈阳性, 37 ℃无反应性，孵育15 min呈阴性; 35份与筛选细胞在LISS/Coombs卡中的反应均呈阳性。采用试管法盐水介质对其血浆做IgM类抗体鉴定; 采用直接IAT对3其做IgG类抗体鉴定，结果显示，无特异性自身抗体32份(91.43%), 抗体特异性为全凝集素(IgM类, 37 ℃无反应性+IgG类); 有特异性自身抗体为0份(0%), 抗体特异性为无; 自生抗体+同种抗体3份(8.57%), 抗体特异性为同种抗-Ce 2份、抗-cE 1份。

交叉配血方面: ① 342例温抗体型AIHA患者中存在51例只有自身抗体且抗体有特异性, 47例同种+自身抗体, 244例只有同种抗体且抗体为全凝集素。主侧交叉配血，无自身抗体对应抗原的献血者红细胞，采用LISS/Coombs卡和试管法LISS-IAT, 分别相合21例、22例; 无同种抗体对应抗原的均相合; 同种抗体且抗体为全凝集素，相合93例，不相合151例。② 23例冷抗体型AIHA患者与献血者采用直接IAT法，均相合。③ 混合抗体型患者与献血者红细胞相合27例，不相合5例。35例混合抗体型中，存在自身+同种抗体3例和只有同种抗体且抗体为全凝集素32例。没有同种抗体对应抗原的用直接IAT法均相合。226例AIHA患者主侧交叉配血相合, 200例采用洗涤红细胞输用, 26例采用悬浮红细胞; 配血不相合者中，选择输用配血相合度相对最高的红细胞35例。

3 讨 论

近年来，AIHA发病率逐渐升高，甚至趋近于白血病[7]，AIHA为一组溶血性贫血疾病，起因于免疫系统功能异常，从而产生自身抗体和(或)补体，与红细胞膜结合后破坏红细胞，引发此种疾病[8]。主要有头晕、高热等表现。自身抗体则是人体重要的免疫性球蛋白[9], 具有免疫作用。AIHA患者体内具备自身抗体，分为温抗体、冷抗体和冷-热抗体[10]，能够凝集所有红细胞，自身抗体包被在红细胞上或游离在血清当中[11]。治疗AIHA患者一般需要多次输血。而输血时遇到的最大困难即自身抗体对患者的血型鉴定、抗体筛选及交叉配血的影响[12]。

本研究400例AIHA患者，温自身抗体有342份(85.50%), 冷自身抗体有23份(5.75%), 混合型自身抗体有35份(8.75%)。其中，有293份自身无特异性抗体, 57份特异性自身抗体, 50份自生+同种抗体; 交叉配血21份LISS/Coombs卡相合, 22份试管法LISS-IAT相合, 193份直接抗人球蛋白法相合，配血均不合有156份。

研究结果[13]显示，采用科学严谨的检测技术对AIHA患者输血前的血型鉴定、抗体筛查及交叉配血，在极大程度上能够避免不良事件的发生，提高治疗成功率。具体对策如下: ① 血型鉴定：若有一些DAT强阳性红细胞温自身抗体在ABO/RhD血型鉴定时，采用血型定型卡处理用试管法正定型红细胞非特异性凝集的问题; 采用DTT处理冷自身抗体导致红细胞自凝的问题; 37℃温度孵育，血浆在自身红细胞吸收之后再做反定型解决反定型时试剂红细胞全凝集的现象[11]。② 抗体筛选及鉴定：温抗体型、冷抗体型、混合抗体型AIHA患者血浆与筛选细胞/谱细胞检测是否存在IgM类同种抗体可采用盐水介质试管法; 温抗体型检测自身抗体是否有特异性，冷抗体型检测自身抗体37 ℃是否有反应性及是否同时存在同种抗体都可采用LISS/Coombs卡; 温抗体型对患者血浆、自身吸收后血浆做抗体鉴定，混合抗体型检测是否同时存在同种抗体都可采用直接IAT法。③ 交叉配血：做主侧交叉配血，对只有自身抗体且抗体有特异性的用LISS/Coombs卡/试管法LISS-IAT, 对没有自身抗体对应抗原的献血者和同种+自身抗体的和只有同种抗体且抗体为全凝集素的红细胞，用直接抗人球蛋白法。④ 输血：可输用洗涤红细胞或悬浮红细胞使得AIHA患者主侧交叉配血相合; 若配血不相合，医生对情况进行鉴定，可筛选出不相合度最低的红细胞进行输血[15]。

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2016-12-23

陕西省教育厅科研项目(B2011213)

R 457.1

A

1672-2353(2017)09-199-03

10.7619/jcmp.201709066