杨丽　李尚为　杨业洲

摘要：目的 了解抗精子抗体（Anti-sperm antibody， ASAb）、抗子宫内膜抗体（Anti-endomertrial antibody， EMAb）、抗心磷脂抗体（Anti -cardiolioin antibody， ACAb）在不孕不育患者中的阳性率。方法 将11984例样本用酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay ， ELISA）法进行检测。结果 男性ASAb阳性率11.13%，女性ASAb阳性率10.97%，EMAb阳性率6.47%，ACAb阳性率7.22%，三种抗体中的任意两种抗体阳性率4.36%，三种抗体阳性率3.49%。结论 ASAb、EMAb、ACAb在不孕不育患者中的阳性率高，可能是导致患者不孕不育的重要因素之一。

关键词：不孕不育，抗精子抗体，内膜抗体，心磷脂抗体

不孕不育患者越来越多，其中不明原因的不孕不育约占50%，而不明原因中以免疫因素为主[1]。现代免疫学认为抗精子抗体、抗子宫内膜抗体、抗心磷脂抗体与不孕不育关系密切。现就本中心2015年全年检测的不育抗体结果进行分析，以了解不育抗体在不孕不育患者中的发病率及为临床的诊疗提供一定的理论依据。

1资料与方法

1.1一般资料 将2015年1月～2015年12月在本中心检测的不育抗体结果进行分析，共11984例。其中男性3558例，年龄20～60岁，平均年龄32.4岁；女性8426例，年龄18～54岁，平均年龄34.6岁。

1.2仪器与试剂

1.2.1仪器 低速离心机、恒温水浴箱、全自动洗板机、酶标仪。

1.2.2试剂 抗精子抗体检测试剂盒、抗内膜抗体试剂盒、抗心磷脂抗体试剂盒（均为南京欣迪有限公司提供）。

1.3检测方法

1.3.1标本采集 检测者静坐5 min后，抽取2 ml静脉血于红头管内（女性受检者避开月经期），静置30 min后，3000rpm离心5 min，吸出血清放置-20℃冰箱保存（1 w内进行检测）。男性仅检测抗精子抗体，女性进行抗精子抗体、内膜抗体和心磷脂抗体的检测。

1.3.2实验方法 三种抗体的检测均采用ELISA法，96孔板每板均设置空白、阳性对照、阴性对照、实验室阳性及实验室阴性对照。各孔加100 μl样本稀释液，5 μl样本充分混匀后37℃孵育40 min，洗板4次，1min/次；拍干后分别加入二抗，37℃孵育30 min，洗板4次，1min/次，拍干后进行显色各加入显色液A一滴，B一滴，终止液一滴，避光显色10 min后在450 nm波长处读取吸光值；根据公式计算结果，所有实验质控都在控。

2结果

2015年全年不育抗体检测结果，男性3558例，抗精子抗体阳性396例，阳性率11.13%。女性8426例，抗精子抗体阳性924例，阳性率10.97%；内膜抗体阳性545例，阳性率6.47%；心磷脂抗体阳性609例，阳性率7.22%；其中三种抗体中的任意两项为阳性者367例，占女性受检者的4.36%；三项均为阳性者294例，占女性受检者的3.49%。

3讨论

近年来不孕不育成为研究的热点，免疫因素引起的不明原因的不育受到大家的重视。抗精子抗体是免疫因素的一个重要方面，它可存在于血液和淋巴系统或者局部的分泌物中，如精液、宫颈粘液等。正常情况下，精子不会引起自身免疫反应，不会有抗精子抗体的产生，当男性的血睾屏障被破坏如生殖道梗阻、手術、外伤、炎症等可使机体产生抗体[2]。女性产生抗精子抗体的途径包括生殖道粘膜损伤、生殖道感染等。有研究表明ASAb的产生会影响男性精液的质量，ASAb阳性率越高精子的密度、活力越低[3]。ASAb还可影响精子穿透卵子的透明带，从而影响受精率，导致不孕不育[4]。ASAb对IVF的成功率也有一定的影响，有报道表明ASAb对IVF的受精率、优胚率及移植率均有影响[5]。可见ASAb不仅会降低男性精子的密度和活力，同时女性体内的ASAb可影响精子和卵子的结合，阻碍受精卵的形成，导致不孕不育的发生。

EMAb是一种自身抗体，是针对子宫内膜腺上皮细胞中的孕激素依赖蛋白产生的抗体，正常位置的子宫内膜对机体无抗原性，但异常位置的子宫内膜可以作为抗原激活机体的免疫系统，产生抗体，激活补体，使局部发生病理变化，甚至直接影响子宫内膜的功能。有研究表明子宫内膜异位症（EMS）的EMAb阳性率明显高于正常对照组，在不孕妇女和流产妇女中也有较高的阳性率[6]。EMAb阳性提示子宫内膜功能可能受损，这会影响受精卵的着床，甚至导致已着床发育的胚胎没有很好的支持条件而流产。EMAb在对EMS中也是高表达，对EMS的诊断有很好的提示作用。

ACAb是一种可以与多种富含磷脂结构的抗原物质发生反应的自身免疫性抗体。有报道[7]表明ACAb与自然流产、复发性流产、宫内死胎、宫内发育迟缓、不孕等疾病相关。ACAb可能是通过与卵巢、精子、子宫内膜的磷脂成分结合，从而干扰了卵子的形成和排除，影响精子的活力，影响受精卵的着床，导致不孕不育的发生[8]。ACAb作用于滋养层细胞表面依赖性抗原，影响绒毛膜粘附、分化和细胞滋养层的浸润，从而影响受精卵的着床。ACAb可影响精子的活力、卵子的成熟、受精卵的着床，还与流产有关，是影响不孕、流产和胎停的重要因素，目前我院产科已将ACAb检测作为产科建卡的常规检测指标。ACAb还与血栓的形成、结缔组织病、缺血性中风、肾脏病等有关[9]。

目前各文献所报道的不育抗体阳性率差别很大，主要是各检测实验室所采用的方法和试剂盒不一所致，暂时还没有检测的金标准。不育抗体越来越受到临床的重视，但由于检测方法和试剂所包被的抗原不一致，所以各实验室的结果不一致，影响临床医师的判断和对疾病的诊断，所以对于不育抗体检测的方法急需标准化。

本中心2015年男性ASAb阳性率11.13%，女性ASAb阳性率10.97%，EMAb阳性率6.47%，ACAb阳性率7.22%，任意两种抗体阳性4.36%，三种抗体阳性率3.49%。各类抗体的阳性率还是比较高，对于孕前检查、不孕不育、子宫内膜异位症、IVF术前检查等都应给予重视，阳性患者应给以治疗后再进行下一步的诊疗，可提高疾病治愈成功率。

参考文献：

[1]吴忠旺，巫翠萍.不孕不育患者抗精子抗体检测分析[J].海南医学，2011，22（9）：108-109.

[2]孙莉（综述），武军驻（审校）.抗精子抗体引起不孕不育的机制研究[J].检验医学与临床，2014，11（1）：109-110.

[3]姜天华.探讨男性不育症精液检验和血清中抗精子抗体的相关性[J].临床医学专集，2015：1563-1563.17（5）128-128.

[4]Shulman S.ANTISPERM ANTIBODIES AND FERTILITY[J]. Lancet，2013，37（9）：571-578.

[5]Zini A，Lefebvre J，Kornitzer G，et al.Anti-sperm antibody levels are not related to fertilization or pregnancy rates after IVF or IVFICSI[J]. Journal of Reproductive Immunology，2011，88（1）：80-84.

[6]劉桂兰，石晶，王芳芳，等.抗子宫内膜抗体与 CA125对于子宫内膜异位症的诊断价值[J].航空航天医学杂志，2014，25（2）：129-131.

[7] 黄越，王昕.中西医治疗抗心磷脂抗体阳性复发性流产概况[J].实用中医内科杂志，2016，30（8）：108-109.

[8]李凤中，陈波，黄永建.抗心磷脂抗体检测在孕妇不良妊娠结局中的临床意义[J].实验与检验医学，2014，32（1）：68-70.

[9]陈芯仪，陈月红，孙瑞雪，等.694例抗心磷脂抗体阳性病例病因构成和临床特点分析[J].血栓与止血学，2015，21（2）：65-69.

编辑/李桦