microRNA195在心力衰竭的表达及其对心肌细胞增殖的影响
2017-03-02张娴谢连红朱旭婷林琳曲毅
张娴,谢连红,朱旭婷,林琳,曲毅
· 论著 ·
microRNA195在心力衰竭的表达及其对心肌细胞增殖的影响
张娴1,谢连红1,朱旭婷1,林琳1,曲毅1
目的探讨microRNA-195(miR-195)在心力衰竭(心衰)患者的表达及其对心肌细胞H9C2增殖的影响。方法选取2015年3月~2015年7月于上海市第一人民医院56例心衰患者和40例正常人群血清标本为研究对象,利用Taqman探针实时定量PCR方法检测miR-195的表达,用阳离子脂质体Lipofectamine 2000将miR-195类似物(mimic)转染到H9C2心肌细胞中,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和EdU实验检测细胞增殖情况,Western blot检测其下游CDCA4 蛋白的表达情况。比较心衰患者和正常人群血清及转染心肌细胞中miR-195表达、分析miR-195对心肌细胞增殖及CDCA4 蛋白表达的影响。结果与正常人群相比,心衰患者血清中miR-195表达量明显升高(P<0.05),MTT结果显示在转染48、72、96 h后,转染miR-195 mimic组细胞吸光值明显低于阴性对照组(P<0.05)。EdU结果显示miR-195转染组细胞增殖受到明显抑制(P<0.05)。Western blot结果显示miR-195抑制心肌细胞中CDCA4 蛋白表达。结论miR-195在心衰患者血清中表达水平升高,并且可能通过影响CDCA4的表达抑制H9C2细胞的增殖。
miR-195;心力衰竭;增殖;心肌细胞
心力衰竭(心衰)是一种复杂的病理生理状态,以心脏的收缩功能和(或)舒张功能障碍为主要特点[1]。心衰的病因主要为心肌梗死、心肌病、血流动力学负荷过重、炎症等原因引起的心肌损伤,造成心肌结构和功能的变化,最后导致心室泵血或充盈功能低下。心衰的患病率和致死率高,严重影响生活质量,有研究显示,目前心衰影响人群约占世界总人口的0.4%~2%,是人类健康第一大杀手[2]。
microRNA是一类长约20~25nt的高度保守的内源性单链小分子非编码RNA,通过与相关蛋白形成RNA诱发沉默复合体来介导转录后基因表达的调控,决定细胞分化、胚胎发育等一系列重要生命活动的进程及多样性,是一种重要的基因转录后调控机制[3]。……
