易刚强��+蔡嘉洛��+朱贻霖��+张亚利��+刘峰��+刘湘丹��+高昱��+童巧珍��

摘要：对Trizol法、CTAB法、十二烷基磺酸钠（SDS）法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法5种RNA提取方法提取金银花叶片、茎、根、花蕾组织RNA的效果进行比较，以期获得质量较好的金银花不同器官的RNA，为后续分子生物学试验奠定基础。结果表明：改进后的多糖多酚试剂盒法能够克服金银花中RNA提取难度大的问题，能够提取到质量、产量都很高的RNA，且稳定性好、无DNA污染，可以满足进一步的半定量反转录PCR（RT-PCR）等试验需要。

关键词：金银花；不同组织；总RNA；提取方法；改良多糖多酚试剂盒

中图分类号： S184文献标志码：

文章编号：1002-1302（2016）08-0063-03

金银花（Floe Lonicerae）别称忍冬花、银花等，为忍冬科（Capfifoliaceae）忍冬属（Lonicera）植物忍冬（Lonicera japonica Thunb.）以及同属多种植物的干燥花蕾及其初开的花，具有清热解毒、凉散风热等功效[1]。当前，随着人们消费水平的提高及对中药材日益增长的需求，提高金银花的绿原酸产量、品质已经具有重大意义。有研究表明，在金银花绿原酸研究中，对控制绿原酸等活性物质相关酶基因在金银花不同部位的表达模式进行分析极其重要；同时，反转录PCR（RT-PCR）、cDNA文库构建等都需要高质量的RNA。目前，金银花总RNA提取方法包括Trizol法、SDS法等[2-4]。本研究以金银花根、茎、叶、花蕾为材料，通过对Trizol法、CTAB法、SDS、多糖多酚试剂盒法、改良多酚试剂盒法行比较，探索从富含多糖的金银花组织中提取高质量、无DNA污染的RNA方法，以期为金银花分子生物学研究及提高其活性成分含量研究奠定基础。

1材料与方法