蒲鹏+谢晓东+白子彧+郭雨+古同华+李明+王俊斌+孙守钧+丁博

摘要：启动子决定了基因的组织器官表达特异性及其在环境、内源激素作用下的诱导型表达，因此对启动子的分析有利于解析基因的表达模式及功能。对玉米Ubiquitin启动子控制的nptII抗性基因添加适宜的酶切位点，连接到pGWB433双元载体中，构建目标表达载体p14781pro-GUS。该载体具有适于在禾谷类作物中筛选转基因植株的Ubiquitin-nptII组件、启动子高效克隆的Gateway组件，且整合进载体的启动子可控制报告基因GUS的表达，以确定启动子的转录调控模式，因而能够更加深入便捷地研究禾谷类作物重要性状相关基因的启动子，推动针对重要性状的分子遗传改良。

关键词：启动子；载体构建；p14781pro-GUS；GUS蛋白；限制性内切酶

中图分类号： Q782文献标志码：

文章编号：1002-1302（2016）08-0060-03

目前，应用于双子叶转基因体系中启动子分析的载体非常丰富，如pGWB系列载体，研究也已非常完备。而单子叶植物转基因体系的研究尽管已取得很好进展，但适于单子叶特别是禾谷类作物启动子研究的载体却非常有限。

在植物表达载体中广泛应用的启动子是组成型启动子，例如，绝大多数双子叶转基因植物均使用CaMV 35S启动子，禾谷类转基因植物主要使用来自玉米的Ubiquitin启动子[1]和来自水稻的Actin I启动子[2]。在这些组成型表达启动子的控制下，外源基因可在转基因植物的所有部位和所有发育阶段表达[3]。

Ubiquitin 启动子是一个在禾谷类作物中有较强表达的启动子，Ubiquitin启动子来自玉米多聚泛素蛋白基因（maize polyubi gene），它实际上包括Ubiquitin基因的启动子区、5′非翻译区和第一内含子。……