唐会会+郑玉才+王鹏非+金素钰+黄林

摘要：测定牦牛基因序列，并比较其在牦牛和雄性不育犏牛睾丸组织中的表达差异，以探究该基因与犏牛雄性不育的关系。从牦牛睾丸组织中提取总RNA，采用RT-PCR技术克隆并测序获得牦牛基因的cDNA序列；利用实时荧光定量RT-PCR技术检测该基因在牦牛与犏牛睾丸组织中的表达情况。结果表明：克隆获得的牦牛Prdx5序列长759 bp，包含长660 bp的CDS区，该序列与普通牛基因相差4个碱基，序列同源性为99.47%，相差的4个核苷酸导致推导的氨基酸序列存在3个氨基酸残基差异；[WTBX][STBX]Prdx5[WTBZ][STBZ]在牦牛和犏牛睾丸组织中均有表达，在牦牛睾丸组织中的表达量极显著高于犏牛（P<0.01），是犏牛睾丸组织中表达量的6倍，提示Prdx5在犏牛睾丸组织中低水平表达可能与其雄性不育有关。

关键词：牦牛；杂交雄性不育；[WTBX][STBX]PRDX5[WTBZ][STBZ]基因；基因表达；睾丸

中图分类号： Q785；S823.8文献标志码：

文章编号：1002-1302（2016）08-0053-04

过氧化物氧化还原酶（Peroxiredoxin，PRDX）家族是过氧化物酶超家族成员[1]，广泛分布于原核及真核生物体内[2-3]。该家族蛋白利用其N-端保守的Cys残基催化还原细胞内活性氧（ROS），从而保护细胞免受内外界环境中氧化胁迫带来的损害，是一类巯基依赖性抗氧化蛋白酶[3]。PRDX5别称AOEB166、PMP20、AOPP，是哺乳动物Prx家族中唯一的非典型2-Cys Prx [4]，主要分布于细胞的线粒体、溶酶体、细胞质、细胞核中[5-8]。该酶不仅在免疫调控[9]、细胞凋亡[10]、信号通路调节[11]等方面发挥作用，其功能主要在于还原细胞内过量的ROS。过量的ROS会引起细胞及组织损伤，对动物精子细胞更易造成损害，使精子细胞膜脂质过氧化、DNA结构破坏、凋亡加速，最终导致哺乳动物雄性不育[12]。据估计，约1/4不育男性患者精液中ROS水平升高[13-14]。……