黄海涛 张华



Cbl-b基因介导T细胞免疫杀伤小鼠LA795肺腺癌细胞的实验研究

黄海涛1张华2

目的 利用特异性小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)沉默T细胞Cbl-b基因表达，观察转染T细胞对小鼠肺腺癌细胞LA795的体外免疫杀伤作用。方法 筛选高效特异性沉默Cbl-b基因的siRNA序列转染T739小鼠脾脏T细胞，转染72h后，利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-2、INF-γ等T细胞免疫因子分泌情况，比较单纯T细胞、阴性对照T细胞及转染T细胞与小鼠肺腺癌细胞LA795混合培养肿瘤杀伤率。结果转染72h后，转染组细胞因子IL-2、INF-γ分泌水平较空转组和空白组显著增加。在体外实验中，与单纯T细胞及阴性对照T细胞相比，转染T细胞能更高效杀伤小鼠肺腺癌细胞LA795，最高杀瘤率达到58.38±3.82%。结论 利用特异性siRNA技术沉默Cbl-b基因能够促进小鼠T细胞因子IL-2和INF-γ分泌，增强T细胞对肺腺癌细胞LA795的体外免疫杀伤作用。

Cbl-b；基因沉默；T淋巴细胞；肺腺癌；免疫疗法

肺癌是临床上最常见恶性肿瘤，其发病率和死亡率均居男性恶性肿瘤首位，女性恶性肿瘤第二位[1]。肺腺癌属于非小细胞癌，多数起源于支气管黏膜上皮，晚期肺腺癌通过淋巴及血液等途径全身多处转移，多数已不适合手术切除，且放化疗不能显著提高肺癌总体生存期，耐药现象普遍，难以得到持久缓解，患者远期预后差[2]。与其他肿瘤类似，肺癌发生发展与机体免疫系统功能密切相关，发病个体均存在有不同程度的抗肿瘤免疫缺陷。研究发现，约30%-50%非小细胞肺癌表达黑色素瘤抗原MAGE-A3，肺癌组织内细胞毒性T淋巴细胞对肿瘤组织的渗透活性明显减弱，免疫抑制细胞活性增强，肿瘤局部微环境处于免疫抑制状态[3]。……