孔维健,常宇鑫,昝春芳,郑 爽，杨小玉

(吉林大学第二医院 骨科，吉林 长春130041)

基于Cre-loxP系统条件性基因敲除小鼠的构建及其应用进展

孔维健,常宇鑫,昝春芳,郑 爽*，杨小玉*

(吉林大学第二医院 骨科，吉林 长春130041)

随着科研技术水平的不断提高，转基因技术在基础实验研究中得到了广泛的应用，基因敲除技术是转基因技术中不可替代的组成部分，而条件性基因敲除技术作为新一代基因敲除技术，与第一代基因敲除技术相比显然有着明显的优势和更为广泛的应用前景。其中基于Cre-loxP系统的条件性基因敲除小鼠因其良好的实验效果得到了许多研究的青睐，现已有多篇相关文献的成功报道。但Cre-loxP系统作为一项新技术，其相关原理及应用归纳尚不完善，在不同实验中构建Cre-loxP系统条件性基因敲除小鼠的具体方法也有所差异。本文以条件性基因敲除技术中典型的Cre-loxP系统为中心，通过查阅回顾相关文献，归纳出Cre-loxP系统的基本作用原理和应用该系统构建条件性基因敲除小鼠的一般方法，并对Cre-loxP系统构建的基因敲除小鼠在基础研究领域的应用加以分类，综述如下。

1 cre-loxp系统基本作用原理

1.1Cre重组酶(CyclizationRecombinationEnzyme)和loxP(locusofX-overP1)序列

Cre重组酶是大肠杆菌噬菌体P1中cre基因编码表达的由343个氨基酸组成的相对分子质量为38000的蛋白质[1]。它可以特异性识别细胞内基因或DNA上的loxP序列，并根据loxP序列的位置和loxP序列之间的关系介导不同的特异性重组反应。loxP序列是从大肠杆菌P1噬菌体中发现的长34 bp的碱基序列，由两个13bp的反向重复序列和中间8 bp的间隔序列组成。……