黄佳杞 黄秦特 章国卫

●综 述

CRISPR/Cas9在基因治疗中的应用研究进展

黄佳杞 黄秦特 章国卫

常间回文重复序列丛集/常间回文重复序列丛集关联蛋白9（clustered reg ularly intersp aced short p alind romic rep eats，CRISPR）/（CRISPR-associated p roteins 9，Cas 9）改造的第3代人工核酸内切酶，因其简单、高效等优点，已成为一种热门的基因编辑工具。近年来一些研究成功应用CRISPR/Cas 9系统在体内外进行相关疾病基因的靶向修饰，为基因编辑技术在临床的应用奠定了基础，但其脱靶效应、导入方式、编辑效率等仍需改进。本文将对CRISPR/Cas9在基因治疗中的应用进展作一综述。

CRISPR/Cas9 基因治疗 应用研究

精确的基因编辑可以通过敲除内源性的致病基因或插入新的保护基因以永久性地改变基因而起到治疗疾病的作用。常间回文重复序列丛集/常间回文重复序列丛集关联蛋白9（clustered regularly interspaced short palindromic repeats，CRISPR）/（CRISPR-associated proteins 9，Cas 9）作为第3代基因组编辑工具，与第1代锌指核糖核酸酶（ZFN）和第2代转录激活因子样效应物核酸酶（TALEN）相比，CRISPR/Cas 9具有更易于操作、编辑效率更高、更容易得到纯合子突变体且可以在不同的位点同时引入多个突变等显著优势。因此，CRISPR/ Cas 9得到了广泛的关注和应用。目前CRISPR/Cas 9在基因治疗中的应用研究主要集中于单基因遗传病、病毒感染和肿瘤等疾病。本文对CRISPR/Cas9在基因治疗中的应用研究进展综述如下。

1 CRISPR/Cas9工作原理

CRISPR/Cas系统是一种原核生物特有的针对外源性遗传物质免疫系统，通过序列特异的RNA介导，切割降解外源性DNA，这些外源性遗传物质包括噬菌体或者外源性质粒。CRISPR/Cas系统可分为3种类型，其中类型ⅡCRISPR/Cas系统由于其组成简单，被改造成为基因组靶向编辑的工具。……