岳红红, 赵 亮, 姜 威

表达黑色素瘤抗原-A3重组质粒的免疫原性研究

岳红红1, 赵 亮2, 姜 威2

目的 对新型肺癌基因疫苗的免疫原性进行评价。 方法 利用Furin 2A将黑色素瘤抗原A3(MAGE-A3)基因与GM-CSF基因进行连接，克隆入真核表达载体pVAX1，构建基因疫苗pVAX1- MAGE-A3-F2A-GM-CSF。将该疫苗体外转染293T细胞，利用免疫印迹和ELISA的方法对其表达情况进行检测。然后，将疫苗及对照组分别免疫接种小鼠，通过ELISA和ELISPOT法初步检测其诱导的体液免疫和细胞免疫反应。 结果 成功克隆并构建了肺癌基因疫苗pVAX1- MAGE-A3-F2A-GM-CSF，并证实了其在真核细胞中表达。疫苗免疫接种小鼠模型后的检测结果显示，与空载体对照组以及单独抗原组相比，pVAX1- MAGE-A3-F2A-GM-CSF能够诱导产生更强的体液免疫反应和细胞免疫反应。结论 pVAX1- MAGE-A3-F2A-GM-CSF能够同时诱导较强的体液免疫和细胞免疫反应，其抗肿瘤效应将通过进一步实验深入研究。

黑色素瘤相关抗原 A3 (MAGE-A3)；肺癌；粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子；基因疫苗

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，已成为死亡的首要病因。据统计，每年新确诊肺癌达160 万，每年有 140 万人死于肺癌[1]。 肺癌最常见的组织学类型是非小细胞肺癌 (nonsmall-cell lung cancer, NSCLC)，占肺癌总数的 81%，有 60% 患者在就诊时已属进展期或难以治愈的Ⅲ b期或Ⅳ期，失去了手术机会，预后极差[2]。寻找有效的治疗方法是当务之急。近年来，随着靶向治疗和免疫治疗等新兴疗法的出现，NSCLC 的临床治疗取得了很大的进展。作为主动免疫治疗方式的基因疫苗由于其能够诱导强烈的细胞免疫应答，在肿瘤的免疫治疗研究中成为热点之一[3]。……