李月玥（广州计量检测技术研究院，广州 510030）

ATP荧光检测仪校准方法研究

李月玥（广州计量检测技术研究院，广州 510030）

ATP荧光检测仪是现场水质污染及现场环境物体表面细菌负载的快速检测中逐渐普及的检验仪器，在卫生检测领域中起着重要作用。本文依据ATP荧光检测仪的工作原理，初步建立一套可靠的校准方法，并对其线性误差测量不确定度进行分析。

ATP荧光检测仪；校准方法；测量不确定度

在卫生学评价中，细菌污染检测是常规监测项目。目前，细菌定量检测通常采用琼脂平板计数法，由于其操作复杂，耗费时间长，很难满足HACCP(Hazard Analysis and Critical Control Point) 体系中微生物污染的在线监测[1]。20世纪80年代，英国首先研制ATP荧光检测系统，随后将其应用于检测微生物和食品残渣[2]。

1 ATP荧光检测仪工作原理

ATP荧光检测仪依据ATP生物发光法的基本原理，即荧光素在荧光素酶催化下，由ATP激活，使之与氧结合，在结合过程中发出荧光[3]。其反应如下图1所示。当反应中的荧光素-荧光素酶达到饱和反应量时，ATP含量与所释放的荧光光子量成正比。有研究表明，活细胞数量的对数值与ATP生物荧光值的对数值之间存在良好的线性关系[4]。因此，ATP荧光检测仪以相对荧光强度（relative light units，RLU）数值表示样品中ATP的总量，进而反映样品中活细胞数量。

2 校准方法分析

根据ATP荧光检测仪的性能和工作原理，认为测量线性误差及测量重复性是影响其分析结果的主要技术指标，必须进行校准确认。

通过实验发现，ATP荧光检测仪的测量结果受工作环境影响，特别是外界ATP干扰、环境温度，以及测样时间。……