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花粉介导法获得耐草甘膦玉米植株及其耐性研究

2016-12-21杨慧珍任志强肖建红卜华虎刘惠民

生物技术通报 2016年11期
关键词:除草剂

杨慧珍任志强肖建红卜华虎刘惠民

(1. 山西省农业科学院作物科学研究所,太原 030031;2. 农业部黄土高原作物基因资源与种质创制重点实验室,太原 030031)

花粉介导法获得耐草甘膦玉米植株及其耐性研究

杨慧珍1,2任志强2肖建红2卜华虎2刘惠民2

(1. 山西省农业科学院作物科学研究所,太原 030031;2. 农业部黄土高原作物基因资源与种质创制重点实验室,太原 030031)

为获得耐草甘膦转基因玉米植株,进而研究其除草剂耐性及外源基因的遗传特性,以质粒pBI101-aroA-M12为外源基因供体,以玉米自交系昌‘7-2’为受体,采用花粉介导法将外源基因导入玉米自交系中。PCR扩增、Southern杂交分析的结果证明获得了54个转基因植株;对其后代株系的分子检测及田间生物学鉴定,结果证明目的基因可以稳定遗传给后代植株,且赋予和提高了转基因植株的除草剂耐性。目的基因在转化体中的遗传规律研究,结果显示导入的目的基因在F2受体植株中以3∶1的比例发生遗传分离,符合孟德尔单因子显性遗传分离规律。ELISA分析和蛋白质浓度测定的结果证实目的基因在转化植株中得到表达,表达量介于40.5-112.6 ng/g 叶片鲜重之间,目的基因表达量与该植株的除草剂耐性性状间呈极显著相关,r=0.942 3(P<0.01)。最终研究获得了4个高草甘膦耐性的转基因纯合株系。

玉米;aroA-M12基因;草甘膦耐性;花粉介导;遗传分析

中国是世界上位居第二的玉米(Zea mays L.)生产大国,年玉米种植面积3 000多万hm2,玉米产量达亿余吨,占世界上玉米总产量的20%。即便如此,从2009年开始,我国还是成为玉米的净进口国。……

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