徐建中 王颖妤 严为留 张伟国

（江南大学生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室，无锡 214122）

维生素K2合成途径中主要酶对MK-7产量的影响

徐建中 王颖妤 严为留 张伟国

（江南大学生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室，无锡 214122）

对菌株Y-2维生素K2合成途径中的6个主要酶基因分别进行克隆和表达，以探索不同酶基因对MK-7产量的影响。参照《分子克隆实验指南》完成对基因重组质粒的构建，并对spizizen转化法进行改进，实现重组质粒对菌株Y-2的转化。结果表明，分别过量表达维生素K2合成途径中的6个基因均能提高MK-7的产量。需要指出的是，过表达基因hep S对MK-7产量的影响最大，其中在摇瓶培养组的产量提高了38%，静置培养组的产量提高了48%。其余几个基因过表达后对MK-7产量的影响则根据培养方式的不同而各有差异。

解淀粉芽孢杆菌；甲萘醌-7；合成途径；催化酶

甲萘醌-7是维生素K2（又称甲萘醌，MK-n）中的一员，因甲基萘醌母环C-3位置上含有7个异戊二烯单元的异戊二烯侧链组成，因而称为MK-7（图1）。MK-7具有较长的半衰期，可在血液中稳定存在，因而是哺乳动物中凝血因子II、VII、IX和X的一个重要的辅因子，参与血液凝固［1，2］。在调节骨骼生长方面，因MK-7可以抑制成骨细胞的生长，从而刺激成骨细胞的分化，形成骨头。国外学者指出，补充一定量的MK-7能够提高骨头中的矿物质密度（BMD），降低髋骨骨折风险［3］，还有利于提高骨钙蛋白的羧化作用［4］。此外，MK-7可降低血压［5］，促进以神经生长因子为媒介的PC 12D细胞的轴突生长［6］，通过调控Ca2+的利用和促进Gla蛋白质（matrix gla protein，MGP）的活性，防止钙质在血管中沉淀而造成的动脉硬化［7］等。……