曹姗姗　张文玲　王瑾　周鲁林　刘留　吴燕　肖利力*

（1.北京国际旅行卫生保健中心　北京　100088；2.重庆大学）

免疫磁珠富集与荧光定量PCR技术联合检测丙型肝炎病毒

曹姗姗1张文玲1王瑾1周鲁林1刘留2吴燕2肖利力1*

（1.北京国际旅行卫生保健中心北京100088；2.重庆大学）

建立一种免疫磁珠与荧光定量PCR技术联合检测丙型肝炎病毒的方法。将丙型肝炎病毒抗体与羧基修饰磁珠偶联，制备出特异性丙型肝炎病毒免疫磁珠，并检测活化磁珠富集病毒的效率。结果表明1 mg免疫磁珠与75 μg丙型肝炎病毒单克隆抗体偶联时，具有最高抗体偶联量，该偶联后的磁珠富集丙型肝炎病毒的效率是94.50%；同时检测出丙型肝炎病毒高拷贝和低拷贝样品的重复性良好。本研究探索的免疫磁珠与荧光定量PCR技术的结合具有灵敏性高、特异性强、简便快捷以及可信度高的优点，为丙型肝炎病毒检验与评价提供了有利的技术支持。

丙型肝炎病毒；免疫磁珠；荧光定量

1　前言

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus，HCV）感染而引起的严重威胁人类健康的传染性疾病[1]。HCV能在肝细胞中寄生并进行无限制复制，这将引起人体肝细胞结构和功能发生改变，而慢性感染会进一步发展为慢性进行性肝病，包括肝硬化、肝细胞癌等[2]，因此尽早检测出病毒显得非常重要。HCV感染者血清中丙肝抗原（HCAg）是病毒复制的一个标志物，感染一周后出现并可被检测出来。但由于抗原在血清中含量较低，目前的免疫检测技术（如荧光定量、胶体金、酶和化学发光等）[3]灵敏度不高，因此限制了临床上HCV抗原的检出率。……