刘冬虹　王德莲　郭燕华　聂炎炎　吴　环　曾国权

（广州质量监督检测研究院　广东广州　511447）

重组酶聚合酶扩增技术的研究进展

刘冬虹王德莲*郭燕华聂炎炎吴环曾国权

（广州质量监督检测研究院广东广州511447）

重组酶聚合酶扩增技术是一种可使微量核酸在体外高效快速扩增的新技术。与传统PCR及等温扩增技术相比较，其最显著的优势是在25℃-43℃条件下，5-20 min内观察到检测结果，且操作简单，设备成本低廉，被认为是一种可以代替PCR的新技术。本文综述了重组酶聚合酶扩增技术的原理和特点、检测方法及近十年来在国内外不同领域的应用情况，并展望了该技术在检测领域中的未来方向。

重组酶聚合酶扩增技术；检测方法；应用领域

1　前言

重组酶聚合酶扩增技术（Recombinase Polymerase Amplification，简称RPA）是由国剑桥Babraham研究院成立的TwistDx生物技术公司发明的一种体外核酸等温扩增检测新技术，既可以检测DNA[1，2]，也可以检测RNA[3，4]。由于与聚合酶链式反应（PCR）技术相比较，具有成本低、耗时短、操作简单、不受检测场地限制等优点，因此RPA技术被认为是可以替代PCR的核酸检测技术而受到广泛关注，成为分子检测技术研究的热点之一。自2006年问世以来，该技术已取得长足的发展，并被应用在多个检测领域。

2　RPA技术的原理和特点

2.1技术原理

RPA技术以T4噬菌体核酸复制机制为原理[2]，利用重组酶和单链结合蛋白在常温下协同实现引物和模板的特异结合。反应体系主要有T4噬菌体编码的重组酶蛋白uvsX和uvsY[5]、单链结合蛋白gp32及BsuDNA聚合酶、引物、模板、缓冲液等[2]。……