薛晓晶　张焱鑫　陈会君　马洁　王芳　芦云

（中国检验检疫科学研究院　北京　100123）

分子生物学方法鉴定新资源食品中乳杆菌

薛晓晶张焱鑫陈会君马洁王芳芦云

（中国检验检疫科学研究院北京100123）

采用16S rDNA扩增同源性分析、16S rDNA PCR-RFLP技术、种特异性序列扩增技术，对新资源食品中的副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei、鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus、嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus、植物乳杆菌Lactobacillus plantarum进行鉴定分析。结果表明，16S rDNA扩增同源性分析能够有效鉴定嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌，无法区分副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌；16S rDNA PCR-RFLP技术可以有效鉴定嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌；种特异性序列扩增能够有效鉴定副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌。结合检验工作需要，运用以上方法可以对食品安全国家标准中生化鉴定法难以确认的乳杆菌进行有效鉴别。

新资源食品；乳杆菌鉴定；16S rDNA；RFLP；种特异性扩增

1　前言

自2007年以来的近10年间，我国卫计委（原卫生部）颁布了13条公告[1-9]，批准12种乳酸菌作为新资源食品或新食品原料，其中包括6种乳杆菌（鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus、嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus、副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei、植物乳杆菌Lactobacillus plantarum、罗伊氏乳杆菌Lactobacillus reuteri、发酵乳杆菌Lactobacillus fermentum）。

在行业标准中[10]，分子生物学鉴定技术已可用于乳杆菌属的鉴定，但目前还没有采用此类技术进行食品中乳杆菌菌种鉴定的标准出台，这给食品检测中乳杆菌菌种鉴定工作带来了很大的压力。即使是标准中明确可以检测的乳杆菌，在进行传统生化鉴定时也存在问题，例如GB 4789.35-2010[11]中给出的干酪乳杆菌干酪亚种Lactobacilluscasei subsp. casei、鼠李糖乳杆菌以及标准中没提及的副干酪乳杆菌的生化鉴定结果完全一致，三者无法区分。……