肖雪蓉，佘玉奇，张国改，吴 霞，冯毅凡

(广东药科大学 中心实验室，广东 广州 510006)



二苯基庚烷A干预RAW264.7细胞炎症模型甘油磷脂的UPLC-Q/TOF MS分析

肖雪蓉，佘玉奇，张国改，吴 霞，冯毅凡*

(广东药科大学 中心实验室，广东 广州 510006)

对RAW264.7细胞在不同状态(正常、炎症、给药)下的甘油磷脂成分进行分析，寻找相关的潜在病理药理标志物，阐明二苯基庚烷A在抗炎过程中对甘油磷脂代谢的影响。实验分为空白组(C)、炎症模型组(L)、二苯基庚烷A给药组(D)和布洛芬给药组(B，阳性对照药组)4组。空白组和炎症组给予新鲜培养基，给药组分别给予新配含20 μg/mL二苯基庚烷A和100 μg/mL布洛芬的培养基，1 h后，炎症模型组和给药组按终浓度为0.5 μg/mL加入脂多糖(LPS)培养，24 h后，运用修饰后的Bligh-Dyer方法提取不同状态下RAW264.7细胞的甘油磷脂成分，并通过超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q/TOF MS)在正负离子模式下对甘油磷脂进行一级(MS)和二级(MS/MS)质谱分析。结合二级质谱裂解数据、元素组成、数据库比对等方法鉴定磷脂成分，再通过主成分分析法(PCA)、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)以及t检验筛选潜在的甘油磷脂生物标志物。结果显示，炎症组与空白组比较得到27个潜在病理标志物，二苯基庚烷A给药组与炎症组比较得到23个潜在药理标志物，布洛芬给药组与炎症组比较得到17个潜在药理标志物，主要包括磷脂酰胆碱(PC)、溶血磷脂酰胆碱(lysoPC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、溶血磷脂酰乙醇胺(lysoPE)。研究表明二苯基庚烷A在抗炎过程中引起了甘油磷脂代谢的明显变化，而这些代谢变化与炎症的发生发展密切相关。……